北京华越洋生物
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PinPoint Xa-1

PinPoint Xa-1

PinPoint Xa-1

 

编号

载体名称

北京华越洋生物VECT4860

PinPoint   Xa-1

 

PinPoint Xa-1载体基本信息

载体名称:

PinPoint Xa-1

质粒类型:

大肠杆菌表达载体;蛋白纯化

表达水平:

启动子:

Tac

克隆方法:

多克隆位点,限制性内切酶

载体大小:

3331 bp

5' 测序引物及序列:

PinPoint-F: cgtgacgcggtgcagggcg 

3' 测序引物及序列:

SP6: ATTTAGGTGACACTATAG

载体标签:

N-BiotinN-Factor Xa

载体抗性:

氨苄

备注:

主要用于生物素标记蛋白生产和纯化。

稳定性:

瞬表达

组成型:

组成型

病毒/非病毒:

非病毒

 

PinPoint Xa-1载体质粒图谱和多克隆位点信息

PinPoint Xa-1载体简介

PinPoint Xa 蛋白纯化系统用来生产和纯化在体内连接了生物素的融合蛋白质。在一个载体上,将编码需要纯化蛋白质的DNA序列克隆在载体上的一个编码体内添加生物素的短肽序列的下游。连接生物素的融合蛋白在大肠杆菌内生成,然后用SoftLink软释放抗生物素蛋白树脂亲和纯化。这个树脂是专利技术,可将蛋白质以非变性形式洗脱出来。PinPoint载体的特点是含有编码内源蛋白酶因子Xa(发音为Ten a)的蛋白水解位点,使得纯化标签可从天然蛋白上分离。载体还带有方便得多克隆区域,便于构建融合蛋白。

系统的几个载体含有所有可能的有义读码框,还含有连接着生物素的树脂、一个纯化柱以及生物素,PinPoint Xa对照载体含有氯素酶转乙酰基酶(CAT)基因,作为监控蛋白表达、纯化和加工条件的手段。在这个系统中,每升培养物一般产生1-5 mg蛋白。

PinPoint Xa-1特点
胞内添加生物素标签:用于纯化融合蛋白;得到的许多蛋白质是可溶的。
易于使用:可以通过柱子,也可以批量用SoftLink树脂纯化生物素标签蛋白质。
便于检测:链霉亲和素碱性磷酸酶可用于检测生物素标签的融合蛋白质,以假-Western方式,监控纯化过程。
灵活:所有读码框都有相应的PinPoint载体。
温和释放条件:SoftLink树脂允许在非变性条件下释放融合蛋白质。
tac启动子:可以严格调控表达。

PinPoint Xa-1应用
纯化毫克数量的表达蛋白。
生产新颖的生物试剂。
TetraLink 树脂同用可以制造亲和柱。

 

PinPoint Xa-1载体序列

ORIGIN     

        1 ATGAAACTGA AGGTAACAGT CAACGGCACT GCGTATGACG TTGACGTTGA CGTCGACAAG

       61 TCACACGAAA ACCCGATGGG CACCATCCTG TTCGGCGGCG GCACCGGCGG CGCGCCGGCA

      121 CCGGCAGCAG GTGGCGCAGG CGCCGGTAAG GCCGGAGAGG GCGAGATTCC CGCTCCGCTG

      181 GCCGGCACCG TCTCCAAGAT CCTCGTGAAG GAGGGTGACA CGGTCAAGGC TGGTCAGACC

      241 GTGCTCGTTC TCGAGGCCAT GAAGATGGAG ACCGAGATCA ACGCTCCCAC CGACGGCAAG

      301 GTCGAGAAGG TCCTGGTCAA GGAGCGTGAC GCGGTGCAGG GCGGTCAGGG TCTCATCAAG

      361 ATCGGGGATC TCGAGCTCAT CGAAGGTCGC GAAGCTTCAG CTGGGATCCG GTACCGATAT

      421 CAGATCTCCC GGGGCGGCCG CGATCTGGTT CTATAGTGTC ACCTAAATCG TATGTGTATG

      481 ATACATAAGG TTATGTATTA ATTGTAGCCG CGTTCTAACG ACAATATGTC CATATGGTGC

      541 ACTCTCAGTA CAATCTGCTC TGATGCCGCA TAGTTAAGCC AGCCCCGACA CCCGCCAACA

      601 CCCGCTGACG CGCCCTGACG GGCTTGTCTG CTCCCGGCAT CCGCTTACAG ACAAGCTGTG

      661 ACCGTCTCCG GGAGCTGCAT GTGTCAGAGG TTTTCACCGT CATCACCGAA ACGCGCGAGA

      721 CGAAAGGGCC TCGTGATACG CCTATTTTTA TAGGTTAATG TCATGATAAT AATGGTTTCT

      781 TAGACGTCAG GTGGCACTTT TCGGGGAAAT GTGCGCGGAA CCCCTATTTG TTTATTTTTC

      841 TAAATACATT CAAATATGTA TCCGCTCATG AGACAATAAC CCTGATAAAT GCTTCAATAA

      901 TATTGAAAAA GGAAGAGTAT GAGTATTCAA CATTTCCGTG TCGCCCTTAT TCCCTTTTTT

      961 GCGGCATTTT GCCTTCCTGT TTTTGCTCAC CCAGAAACGC TGGTGAAAGT AAAAGATGCT

     1021 GAAGATCAGT TGGGTGCACG AGTGGGTTAC ATCGAACTGG ATCTCAACAG CGGTAAGATC

     1081 CTTGAGAGTT TTCGCCCCGA AGAACGTTTT CCAATGATGA GCACTTTTAA AGTTCTGCTA

     1141 TGTGGCGCGG TATTATCCCG TATTGACGCC GGGCAAGAGC AACTCGGTCG CCGCATACAC

     1201 TATTCTCAGA ATGACTTGGT TGAGTACTCA CCAGTCACAG AAAAGCATCT TACGGATGGC

     1261 ATGACAGTAA GAGAATTATG CAGTGCTGCC ATAACCATGA GTGATAACAC TGCGGCCAAC

     1321 TTACTTCTGA CAACGATCGG AGGACCGAAG GAGCTAACCG CTTTTTTGCA CAACATGGGG

     1381 GATCATGTAA CTCGCCTTGA TCGTTGGGAA CCGGAGCTGA ATGAAGCCAT ACCAAACGAC

     1441 GAGCGTGACA CCACGATGCC TGTAGCAATG GCAACAACGT TGCGCAAACT ATTAACTGGC

     1501 GAACTACTTA CTCTAGCTTC CCGGCAACAA TTAATAGACT GGATGGAGGC GGATAAAGTT

     1561 GCAGGACCAC TTCTGCGCTC GGCCCTTCCG GCTGGCTGGT TTATTGCTGA TAAATCTGGA

     1621 GCCGGTGAGC GTGGGTCTCG CGGTATCATT GCAGCACTGG GGCCAGATGG TAAGCCCTCC

     1681 CGTATCGTAG TTATCTACAC GACGGGGAGT CAGGCAACTA TGGATGAACG AAATAGACAG

     1741 ATCGCTGAGA TAGGTGCCTC ACTGATTAAG CATTGGTAAC TGTCAGACCA AGTTTACTCA

     1801 TATATACTTT AGATTGATTT AAAACTTCAT TTTTAATTTA AAAGGATCTA GGTGAAGATC

     1861 CTTTTTGATA ATCTCATGAC CAAAATCCCT TAACGTGAGT TTTCGTTCCA CTGAGCGTCA

     1921 GACCCCGTAG AAAAGATCAA AGGATCTTCT TGAGATCCTT TTTTTCTGCG CGTAATCTGC

     1981 TGCTTGCAAA CAAAAAAACC ACCGCTACCA GCGGTGGTTT GTTTGCCGGA TCAAGAGCTA

     2041 CCAACTCTTT TTCCGAAGGT AACTGGCTTC AGCAGAGCGC AGATACCAAA TACTGTCCTT

     2101 CTAGTGTAGC CGTAGTTAGG CCACCACTTC AAGAACTCTG TAGCACCGCC TACATACCTC

     2161 GCTCTGCTAA TCCTGTTACC AGTGGCTGCT GCCAGTGGCG ATAAGTCGTG TCTTACCGGG

     2221 TTGGACTCAA GACGATAGTT ACCGGATAAG GCGCAGCGGT CGGGCTGAAC GGGGGGTTCG

     2281 TGCACACAGC CCAGCTTGGA GCGAACGACC TACACCGAAC TGAGATACCT ACAGCGTGAG

     2341 CATTGAGAAA GCGCCACGCT TCCCGAAGGG AGAAAGGCGG ACAGGTATCC GGTAAGCGGC

     2401 AGGGTCGGAA CAGGAGAGCG CACGAGGGAG CTTCCAGGGG GAAACGCCTG GTATCTTTAT

     2461 AGTCCTGTCG GGTTTCGCCA CCTCTGACTT GAGCGTCGAT TTTTGTGATG CTCGTCAGGG

     2521 GGGCGGAGCC TATGGAAAAA CGCCAGCAAC GCGGCCTTTT TACGGTTCCT GGCCTTTTGC

     2581 TGGCCTTTTG CTCACATGTT CTTTCCTGCG TTATCCCCTG ATTCTGTGGA TAACCGTATT

     2641 ACCGCCTTTG AGTGAGCTGA TACCGCTCGC CGCAGCCGAA CGACCGAGCG CAGCGAGTCA

     2701 GTGAGCGAGG AAGCGGAAGA GCGCCCAATA CGCAAACCGC CTCTCCCCGC GCGTTGGCCG

     2761 ATTCATTAAT GCAGGTTAAC CTGGCTTATC GAAATTAATA CGACTCACTA TAGGGAGACC

     2821 GGCCTCGAGC AGCAAGGAGA TGGCGCCCAA CAGTCCCCCG GCCACGGGGC CTGCCACCAT

     2881 ACCCACGCCG AAACAAGCGC TCATGAGCCC GAAGTGGCGA GCCCGATCTT CCCCATCGGT

     2941 GATGTCGGCG ATATAGGCGC CAGCAACCGC ACCTGTGGCG CCGGTGATGC CGGCCACGAT

     3001 GCGTCCGGCG TAGAGGATCG ATCCGGGCTT ATCGACTGCA CGGTGCACCA ATGCTTCTGG

     3061 CGTCAGGCAG CCATCGGAAG CTGTGGTATG GCTGTGCAGG TCGTAAATCA CTGCATAATT

     3121 CGTGTCGCTC AAGGCGCACT CCCGTTCTGG ATAATGTTTT TTGCGCCGAC ATCATAACGG

     3181 TTCTGGCAAA TATTCTGAAA TGAGCTGTTG ACAATTAATC ATCGGCTCGT ATAATGTGTG

     3241 GAATTGTGAG CGGATAACAA TTTCACACAG GAAACAGAAT TCCCAGCTTG GCTGCAGAAC

     3301 CATTCCATTC GTTGATCCGG GAGTAACTCA C

//

 

其他大肠杆菌表达载体:

pKD13

PinPoint Xa-1

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pGEX-6P-2

pG-KJE8

pET-46 EK/LIC

pMal-p2G

pGEX-2TK

pGEX-4T-3

pET-49b(+)

pEZZ18

pMal-c2X

pET300/NT-DEST

pBAD-TOPO

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pMal-c4X

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pET-11b(+)

pET-41a(+)

pET-24(+)

pET-44c(+)

pQE-82L

pGEX-4T-1

pMal-p4X

pET-43.1c(+)

pQE-9

pALEX a,b,c

pBad/gIII C

pET-27b(+)

pQE-70

pKD20

pET102/D-TOPO

pET-21a(+)

pET-16b

pRSET B

pACYCDuet-1

pET-20b(+)

pET-21d(+)

pCOLADuet-1

pCYB1

pET-14b

pRSET-EmGFP

pET-42b(+)

pGEX-5X-2

pET-26b(+)

pET301/CT-DEST

pGEX-6P-1

pET-28c(+)

pET-50b(+)

pGro7

pRSET A

pET-32a(+)

pMal-c2G

pET-11a(+)

pRSET C

ptdTomato

pQE-30

pET-12b(+)

pET-42c(+)

pET-43.1b(+)

pET-41c(+)

pET-23b(+)

pET-39b(+)

pBV220

pET-41c(+)

pBad/His C

pET-32b(+)

pCold IV

pETDuet-1

pBAD/Thio-TOPO

pET-29c(+)

pE-SUMO

pTYB12

pCold-ProS2

pET-24b(+)

pACYC184

pEGM-7ZF(+)

pCold III

pBAD33

pBad/Myc-His A

pSP73

pCold-GST

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PinPoint Xa-2

pTXB1

pET-52b(+)

pColdS-SUMO

pTWIN1

pBad/gIII A

pET-23d(+)

pCold II

pET-24a(+)

pkk223-3

pET-29a(+)

pBAD102/D-TOPO

pET-28a(+)

pBAD18

pET-30 EK/LIC

pBad/Myc-His C

pProEX HTc

pET-44 EK/LIC

pET-32 Xa/LIC

pBad/His B

pMal-p2E

pTrcHis B

pET-40b(+)

pET-23a(+)

pQE-60

pGEX-3X

pET-45b(+)

pET-12c(+)

pQE-32

pTrc99a

pMal-c2E

pET-11c(+)

pBad24

pACYC177

pGEX-5X-1

pQE-80L

pET-12a(+)

pMXB10

pGEX-6P-3

pQE-31

pET-23c(+)

pGEX-KG

pTrcHis A

pET-51b(+)

pBad/His A

pTrcHis C

pGEX-2T

pET-47b(+)

pBad/Myc-His B

pET-3a(+)

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pET-22b(+)

pBAD202/D-TOPO

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pBV221

pSUMO

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