pET-28a(+)
pET-28a(+)
编号 | 名称 |
北京华越洋VECT-270 | pET-28a(+) |
pET28a载体基本信息
别名: | pET28a, pet 28a, pET-28a(+) |
质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达 |
表达水平: | 高 |
克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
载体大小: | 5369 bp |
5' 测序引物及序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
3' 测序引物序列: | T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
载体标签: | N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His |
载体抗性: | 卡那 |
备注: | N端含有Thrombin蛋白酶切位点; pET28a, b, c的差异仅仅存在于多克隆位点处。 |
稳定性: | 瞬时表达 Transient |
组成型: | 组成型 Constitutive |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pET28a载体质粒图谱和多克隆位点信息
pET28a载体简介
pET-28a-c(+)载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签，同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pET28a载体序列
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tccgcgaccc atttgctgtc caccagtcat gctagccata
241 tggctgccgc gcggcaccag gccgctgctg tgatgatgat gatgatggct gctgcccatg
301 gtatatctcc ttcttaaagt taaacaaaat tatttctaga ggggaattgt tatccgctca
361 caattcccct atagtgagtc gtattaattt cgcgggatcg agatctcgat cctctacgcc
421 ggacgcatcg tggccggcat caccggcgcc acaggtgcgg ttgctggcgc ctatatcgcc
481 gacatcaccg atggggaaga tcgggctcgc cacttcgggc tcatgagcgc ttgtttcggc
541 gtgggtatgg tggcaggccc cgtggccggg ggactgttgg gcgccatctc cttgcatgca
601 ccattccttg cggcggcggt gctcaacggc ctcaacctac tactgggctg cttcctaatg
661 caggagtcgc ataagggaga gcgtcgagat cccggacacc atcgaatggc gcaaaacctt
721 tcgcggtatg gcatgatagc gcccggaaga gagtcaattc agggtggtga atgtgaaacc
781 agtaacgtta tacgatgtcg cagagtatgc cggtgtctct tatcagaccg tttcccgcgt
841 ggtgaaccag gccagccacg tttctgcgaa aacgcgggaa aaagtggaag cggcgatggc
901 ggagctgaat tacattccca accgcgtggc acaacaactg gcgggcaaac agtcgttgct
961 gattggcgtt gccacctcca gtctggccct gcacgcgccg tcgcaaattg tcgcggcgat
1021 taaatctcgc gccgatcaac tgggtgccag cgtggtggtg tcgatggtag aacgaagcgg
1081 cgtcgaagcc tgtaaagcgg cggtgcacaa tcttctcgcg caacgcgtca gtgggctgat
1141 cattaactat ccgctggatg accaggatgc cattgctgtg gaagctgcct gcactaatgt
1201 tccggcgtta tttcttgatg tctctgacca gacacccatc aacagtatta ttttctccca
1261 tgaagacggt acgcgactgg gcgtggagca tctggtcgca ttgggtcacc agcaaatcgc
1321 gctgttagcg ggcccattaa gttctgtctc ggcgcgtctg cgtctggctg gctggcataa
1381 atatctcact cgcaatcaaa ttcagccgat agcggaacgg gaaggcgact ggagtgccat
1441 gtccggtttt caacaaacca tgcaaatgct gaatgagggc atcgttccca ctgcgatgct
1501 ggttgccaac gatcagatgg cgctgggcgc aatgcgcgcc attaccgagt ccgggctgcg
1561 cgttggtgcg gatatctcgg tagtgggata cgacgatacc gaagacagct catgttatat
1621 cccgccgtta accaccatca aacaggattt tcgcctgctg gggcaaacca gcgtggaccg
1681 cttgctgcaa ctctctcagg gccaggcggt gaagggcaat cagctgttgc ccgtctcact
1741 ggtgaaaaga aaaaccaccc tggcgcccaa tacgcaaacc gcctctcccc gcgcgttggc
1801 cgattcatta atgcagctgg cacgacaggt ttcccgactg gaaagcgggc agtgagcgca
1861 acgcaattaa tgtaagttag ctcactcatt aggcaccggg atctcgaccg atgcccttga
1921 gagccttcaa cccagtcagc tccttccggt gggcgcgggg catgactatc gtcgccgcac
1981 ttatgactgt cttctttatc atgcaactcg taggacaggt gccggcagcg ctctgggtca
2041 ttttcggcga ggaccgcttt cgctggagcg cgacgatgat cggcctgtcg cttgcggtat
2101 tcggaatctt gcacgccctc gctcaagcct tcgtcactgg tcccgccacc aaacgtttcg
2161 gcgagaagca ggccattatc gccggcatgg cggccccacg ggtgcgcatg atcgtgctcc
2221 tgtcgttgag gacccggcta ggctggcggg gttgccttac tggttagcag aatgaatcac
2281 cgatacgcga gcgaacgtga agcgactgct gctgcaaaac gtctgcgacc tgagcaacaa
2341 catgaatggt cttcggtttc cgtgtttcgt aaagtctgga aacgcggaag tcagcgccct
2401 gcaccattat gttccggatc tgcatcgcag gatgctgctg gctaccctgt ggaacaccta
2461 catctgtatt aacgaagcgc tggcattgac cctgagtgat ttttctctgg tcccgccgca
2521 tccataccgc cagttgttta ccctcacaac gttccagtaa ccgggcatgt tcatcatcag
2581 taacccgtat cgtgagcatc ctctctcgtt tcatcggtat cattaccccc atgaacagaa
2641 atccccctta cacggaggca tcagtgacca aacaggaaaa aaccgccctt aacatggccc
2701 gctttatcag aagccagaca ttaacgcttc tggagaaact caacgagctg gacgcggatg
2761 aacaggcaga catctgtgaa tcgcttcacg accacgctga tgagctttac cgcagctgcc
2821 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
2881 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
2941 ttggcgggtg tcggggcgca gccatgaccc agtcacgtag cgatagcgga gtgtatactg
3001 gcttaactat gcggcatcag agcagattgt actgagagtg caccatatat gcggtgtgaa
3061 ataccgcaca gatgcgtaag gagaaaatac cgcatcaggc gctcttccgc ttcctcgctc
3121 actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca ctcaaaggcg
3181 gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg agcaaaaggc
3241 cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc
3301 ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga
3361 ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc
3421 ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcat
3481 agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg
3541 cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc
3601 aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga
3661 gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact
3721 agaaggacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt
3781 ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag
3841 cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg
3901 tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgaa caataaaact
3961 gtctgcttac ataaacagta atacaagggg tgttatgagc catattcaac gggaaacgtc
4021 ttgctctagg ccgcgattaa attccaacat ggatgctgat ttatatgggt ataaatgggc
4081 tcgcgataat gtcgggcaat caggtgcgac aatctatcga ttgtatggga agcccgatgc
4141 gccagagttg tttctgaaac atggcaaagg tagcgttgcc aatgatgtta cagatgagat
4201 ggtcagacta aactggctga cggaatttat gcctcttccg accatcaagc attttatccg
4261 tactcctgat gatgcatggt tactcaccac tgcgatcccc gggaaaacag cattccaggt
4321 attagaagaa tatcctgatt caggtgaaaa tattgttgat gcgctggcag tgttcctgcg
4381 ccggttgcat tcgattcctg tttgtaattg tccttttaac agcgatcgcg tatttcgtct
4441 cgctcaggcg caatcacgaa tgaataacgg tttggttgat gcgagtgatt ttgatgacga
4501 gcgtaatggc tggcctgttg aacaagtctg gaaagaaatg cataaacttt tgccattctc
4561 accggattca gtcgtcactc atggtgattt ctcacttgat aaccttattt ttgacgaggg
4621 gaaattaata ggttgtattg atgttggacg agtcggaatc gcagaccgat accaggatct
4681 tgccatccta tggaactgcc tcggtgagtt ttctccttca ttacagaaac ggctttttca
4741 aaaatatggt attgataatc ctgatatgaa taaattgcag tttcatttga tgctcgatga
4801 gtttttctaa gaattaattc atgagcggat acatatttga atgtatttag aaaaataaac
4861 aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc tgaaattgta aacgttaata
4921 ttttgttaaa attcgcgtta aatttttgtt aaatcagctc attttttaac caataggccg
4981 aaatcggcaa aatcccttat aaatcaaaag aatagaccga gatagggttg agtgttgttc
5041 cagtttggaa caagagtcca ctattaaaga acgtggactc caacgtcaaa gggcgaaaaa
5101 ccgtctatca gggcgatggc ccactacgtg aaccatcacc ctaatcaagt tttttggggt
5161 cgaggtgccg taaagcacta aatcggaacc ctaaagggag cccccgattt agagcttgac
5221 ggggaaagcc ggcgaacgtg gcgagaaagg aagggaagaa agcgaaagga gcgggcgcta
5281 gggcgctggc aagtgtagcg gtcacgctgc gcgtaaccac cacacccgcc gcgcttaatg
5341 cgccgctaca gggcgcgtcc cattcgcca
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其他大肠杆菌表达载体：
