北京华越洋生物
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1

pTrcHis B

pTrcHis B

pTrcHis B

 

编号

载体名称

北京华越洋生物VECT5440

pTrcHis   B

 

pTrcHisB载体基本信息

别名:

pTrcHisB, pTrcHis B

质粒类型:

大肠杆菌蛋白表达载体

表达水平:

高拷贝

启动子:

Trc

克隆方法:

多克隆位点,限制性内切酶

载体大小:

4404 bp

5' 测序引物及序列:

pTrcHis-F: gaggtatatattaatgtatcg

3' 测序引物及序列:

pTrcHis-R: GATTTAATCTGTATCAGG

载体标签:

N-His, N-EK

载体抗性:

Ampicillin

备注:


稳定性:

瞬时表达 Transient

组成型:

组成型 Constitutive

病毒/非病毒:

非病毒

 

pTrcHisB载体质粒图谱和多克隆位点信息

 

pTrcHisB载体简介

pTrcHis载体是来由pBR322质粒衍生而来的表达载体,设计用来在大肠杆菌中进行重组蛋白的高效表达和纯化。

载体上的Trc启动子和rrnB抗终止区使得高水平蛋白表达成为可能.Trc启动子由Trp启动子的-35区域和Lac启动子的-10区域共同组成。pTrcHis载体同时包含有一个LacIq基因,该基因编码了Lac启动子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+还是LacIq-都可以高效抑制插入基因的转录。

进行蛋白表达时,大肠杆菌需要生长到对数生长期,然后加入1mM IPTG,去除阻遏蛋白,诱导表达。载体上的迷你顺反子结构能够增强插入基因的转录水平,从而高水平表达目的蛋白。DNA插入片段位于载体表达片段下游,在其上游有一个N-端融合表达多肽序列,该序列包含有ATG起始密码子,6xHis标签,T7噬菌体10号基因的翻译增强子,X press抗原表位,肠激酶酶切识别位点。

 

pTrcHisB载体序列

ORIGIN

    1 GTTTGACAGC TTATCATCGA CTGCACGGTG CACCAATGCT TCTGGCGTCA GGCAGCCATC

   61 GGAAGCTGTG GTATGGCTGT GCAGGTCGTA AATCACTGCA TAATTCGTGT CGCTCAAGGC

  121 GCACTCCCGT TCTGGATAAT GTTTTTTGCG CCGACATCAT AACGGTTCTG GCAAATATTC

  181 TGAAATGAGC TGTTGACAAT TAATCATCCG GCTCGTATAA TGTGTGGAAT TGTGAGCGGA

  241 TAACAATTTC ACACAGGAAA CAGCGCCGCT GAGAAAAAGC GAAGCGGCAC TGCTCTTTAA

  301 CAATTTATCA GACAATCTGT GTGGGCACTC GACCGGAATT ATCGATTAAC TTTATTATTA

  361 AAAATTAAAG AGGTATATAT TAATGTATCG ATTAAATAAG GAGGAATAAA CCATGGGGGG

  421 TTCTCATCAT CATCATCATC ATGGTATGGC TAGCATGACT GGTGGACAGC AAATGGGTCG

  481 GGATCTGTAC GACGATGACG ATAAGGATCC GAGCTCGAGA TCTGCAGCTG GTACCATATG

  541 GGAATTCGAA GCTTGGCTGT TTTGGCGGAT GAGAGAAGAT TTTCAGCCTG ATACAGATTA

  601 AATCAGAACG CAGAAGCGGT CTGATAAAAC AGAATTTGCC TGGCGGCAGT AGCGCGGTGG

  661 TCCCACCTGA CCCCATGCCG AACTCAGAAG TGAAACGCCG TAGCGCCGAT GGTAGTGTGG

  721 GGTCTCCCCA TGCGAGAGTA GGGAACTGCC AGGCATCAAA TAAAACGAAA GGCTCAGTCG

  781 AAAGACTGGG CCTTTCGTTT TATCTGTTGT TTGTCGGTGA ACGCTCTCCT GAGTAGGACA

  841 AATCCGCCGG GAGCGGATTT GAACGTTGCG AAGCAACGGC CCGGAGGGTG GCGGGCAGGA

  901 CGCCCGCCAT AAACTGCCAG GCATCAAATT AAGCAGAAGG CCATCCTGAC GGATGGCCTT

  961 TTTGCGTTTC TACAAACTCT TTTTGTTTAT TTTTCTAAAT ACATTCAAAT ATGTATCCGC

 1021 TCATGAGACA ATAACCCTGA TAAATGCTTC AATAATATTG AAAAAGGAAG AGTATGAGTA

 1081 TTCAACATTT CCGTGTCGCC CTTATTCCCT TTTTTGCGGC ATTTTGCCTT CCTGTTTTTG

 1141 CTCACCCAGA AACGCTGGTG AAAGTAAAAG ATGCTGAAGA TCAGTTGGGT GCACGAGTGG

 1201 GTTACATCGA ACTGGATCTC AACAGCGGTA AGATCCTTGA GAGTTTTCGC CCCGAAGAAC

 1261 GTTTTCCAAT GATGAGCACT TTTAAAGTTC TGCTATGTGG CGCGGTATTA TCCCGTGTTG

 1321 ACGCCGGGCA AGAGCAACTC GGTCGCCGCA TACACTATTC TCAGAATGAC TTGGTTGAGT

 1381 ACTCACCAGT CACAGAAAAG CATCTTACGG ATGGCATGAC AGTAAGAGAA TTATGCAGTG

 1441 CTGCCATAAC CATGAGTGAT AACACTGCGG CCAACTTACT TCTGACAACG ATCGGAGGAC

 1501 CGAAGGAGCT AACCGCTTTT TTGCACAACA TGGGGGATCA TGTAACTCGC CTTGATCGTT

 1561 GGGAACCGGA GCTGAATGAA GCCATACCAA ACGACGAGCG TGACACCACG ATGCCTGTAG

 1621 CAATGGCAAC AACGTTGCGC AAACTATTAA CTGGCGAACT ACTTACTCTA GCTTCCCGGC

 1681 AACAATTAAT AGACTGGATG GAGGCGGATA AAGTTGCAGG ACCACTTCTG CGCTCGGCCC

 1741 TTCCGGCTGG CTGGTTTATT GCTGATAAAT CTGGAGCCGG TGAGCGTGGG TCTCGCGGTA

 1801 TCATTGCAGC ACTGGGGCCA GATGGTAAGC CCTCCCGTAT CGTAGTTATC TACACGACGG

 1861 GGAGTCAGGC AACTATGGAT GAACGAAATA GACAGATCGC TGAGATAGGT GCCTCACTGA

 1921 TTAAGCATTG GTAACTGTCA GACCAAGTTT ACTCATATAT ACTTTAGATT GATTTAAAAC

 1981 TTCATTTTTA ATTTAAAAGG ATCTAGGTGA AGATCCTTTT TGATAATCTC ATGACCAAAA

 2041 TCCCTTAACG TGAGTTTTCG TTCCACTGAG CGTCAGACCC CGTAGAAAAG ATCAAAGGAT

 2101 CTTCTTGAGA TCCTTTTTTT CTGCGCGTAA TCTGCTGCTT GCAAACAAAA AAACCACCGC

 2161 TACCAGCGGT GGTTTGTTTG CCGGATCAAG AGCTACCAAC TCTTTTTCCG AAGGTAACTG

 2221 GCTTCAGCAG AGCGCAGATA CCAAATACTG TCCTTCTAGT GTAGCCGTAG TTAGGCCACC

 2281 ACTTCAAGAA CTCTGTAGCA CCGCCTACAT ACCTCGCTCT GCTAATCCTG TTACCAGTGG

 2341 CTGCTGCCAG TGGCGATAAG TCGTGTCTTA CCGGGTTGGA CTCAAGACGA TAGTTACCGG

 2401 ATAAGGCGCA GCGGTCGGGC TGAACGGGGG GTTCGTGCAC ACAGCCCAGC TTGGAGCGAA

 2461 CGACCTACAC CGAACTGAGA TACCTACAGC GTGAGCTATG AGAAAGCGCC ACGCTTCCCG

 2521 AAGGGAGAAA GGCGGACAGG TATCCGGTAA GCGGCAGGGT CGGAACAGGA GAGCGCACGA

 2581 GGGAGCTTCC AGGGGGAAAC GCCTGGTATC TTTATAGTCC TGTCGGGTTT CGCCACCTCT

 2641 GACTTGAGCG TCGATTTTTG TGATGCTCGT CAGGGGGGCG GAGCCTATGG AAAAACGCCA

 2701 GCAACGCGGC CTTTTTACGG TTCCTGGCCT TTTGCTGGCC TTTTGCTCAC ATGTTCTTTC

 2761 CTGCGTTATC CCCTGATTCT GTGGATAACC GTATTACCGC CTTTGAGTGA GCTGATACCG

 2821 CTCGCCGCAG CCGAACGACC GAGCGCAGCG AGTCAGTGAG CGAGGAAGCG GAAGAGCGCC

 2881 TGATGCGGTA TTTTCTCCTT ACGCATCTGT GCGGTATTTC ACACCGCATA TGGTGCACTC

 2941 TCAGTACAAT CTGCTCTGAT GCCGCATAGT TAAGCCAGTA TACACTCCGC TATCGCTACG

 3001 TGACTGGGTC ATGGCTGCGC CCCGACACCC GCCAACACCC GCTGACGCGC CCTGACGGGC

 3061 TTGTCTGCTC CCGGCATCCG CTTACAGACA AGCTGTGACC GTCTCCGGGA GCTGCATGTG

 3121 TCAGAGGTTT TCACCGTCAT CACCGAAACG CGCGAGGCAG CAGATCAATT CGCGCGCGAA

 3181 GGCGAAGCGG CATGCATTTA CGTTGACACC ATCGAATGGC GCAAAACCTT TCGCGGTATG

 3241 GCATGATAGC GCCCGGAAGA GAGTCAATTC AGGGTGGTGA ATGTGAAACC AGTAACGTTA

 3301 TACGATGTCG CAGAGTATGC CGGTGTCTCT TATCAGACCG TTTCCCGCGT GGTGAACCAG

 3361 GCCAGCCACG TTTCTGCGAA AACGCGGGAA AAAGTGGAAG CGGCGATGGC GGAGCTGAAT

 3421 TACATTCCCA ACCGCGTGGC ACAACAACTG GCGGGCAAAC AGTCGTTGCT GATTGGCGTT

 3481 GCCACCTCCA GTCTGGCCCT GCACGCGCCG TCGCAAATTG TCGCGGCGAT TAAATCTCGC

 3541 GCCGATCAAC TGGGTGCCAG CGTGGTGGTG TCGATGGTAG AACGAAGCGG CGTCGAAGCC

 3601 TGTAAAGCGG CGGTGCACAA TCTTCTCGCG CAACGCGTCA GTGGGCTGAT CATTAACTAT

 3661 CCGCTGGATG ACCAGGATGC CATTGCTGTG GAAGCTGCCT GCACTAATGT TCCGGCGTTA

 3721 TTTCTTGATG TCTCTGACCA GACACCCATC AACAGTATTA TTTTCTCCCA TGAAGACGGT

 3781 ACGCGACTGG GCGTGGAGCA TCTGGTCGCA TTGGGTCACC AGCAAATCGC GCTGTTAGCG

 3841 GGCCCATTAA GTTCTGTCTC GGCGCGTCTG CGTCTGGCTG GCTGGCATAA ATATCTCACT

 3901 CGCAATCAAA TTCAGCCGAT AGCGGAACGG GAAGGCGACT GGAGTGCCAT GTCCGGTTTT

 3961 CAACAAACCA TGCAAATGCT GAATGAGGGC ATCGTTCCCA CTGCGATGCT GGTTGCCAAC

 4021 GATCAGATGG CGCTGGGCGC AATGCGCGCC ATTACCGAGT CCGGGCTGCG CGTTGGTGCG

 4081 GATATCTCGG TAGTGGGATA CGACGATACC GAAGACAGCT CATGTTATAT CCCGCCGTCA

 4141 ACCACCATCA AACAGGATTT TCGCCTGCTG GGGCAAACCA GCGTGGACCG CTTGCTGCAA

 4201 CTCTCTCAGG GCCAGGCGGT GAAGGGCAAT CAGCTGTTGC CCGTCTCACT GGTGAAAAGA

 4261 AAAACCACCC TGGCGCCCAA TACGCAAACC GCCTCTCCCC GCGCGTTGGC CGATTCATTA

 4321 ATGCAGCTGG CACGACAGGT TTCCCGACTG GAAAGCGGGC AGTGAGCGCA ACGCAATTAA

 4381 TGTGAGTTAG CGCGAATTGA TCTG

//

 

 

其他大肠杆菌表达载体:

pKD13

PinPoint Xa-1

pKD4

pTf16

pTWIN2

pTYB11

pKJE7

pET-17b

pTrcHis2 A

pBad/gIII B

pGEX-6P-2

pG-KJE8

pET-46 EK/LIC

pMal-p2G

pGEX-2TK

pGEX-4T-3

pET-49b(+)

pEZZ18

pMal-c2X

pET300/NT-DEST

pBAD-TOPO

pMal-p2X

pET-33b(+)

pRSET-CFP

pET-23(+)

pMal-c4X

pET-24c(+)

pTrcHis2 B

pET-11b(+)

pET-41a(+)

pET-24(+)

pET-44c(+)

pQE-82L

pGEX-4T-1

pMal-p4X

pET-43.1c(+)

pQE-9

pALEX a,b,c

pBad/gIII C

pET-27b(+)

pQE-70

pKD20

pET102/D-TOPO

pET-21a(+)

pET-16b

pRSET B

pACYCDuet-1

pET-20b(+)

pET-21d(+)

pCOLADuet-1

pCYB1

pET-14b

pRSET-EmGFP

pET-42b(+)

pGEX-5X-2

pET-26b(+)

pET301/CT-DEST

pGEX-6P-1

pET-28c(+)

pET-50b(+)

pGro7

pRSET A

pET-32a(+)

pMal-c2G

pET-11a(+)

pRSET C

ptdTomato

pQE-30

pET-12b(+)

pET-42c(+)

pET-43.1b(+)

pET-41c(+)

pET-23b(+)

pET-39b(+)

pBV220

pET-41c(+)

pBad/His C

pET-32b(+)

pCold IV

pETDuet-1

pBAD/Thio-TOPO

pET-29c(+)

pE-SUMO

pTYB12

pCold-ProS2

pET-24b(+)

pACYC184

pEGM-7ZF(+)

pCold III

pBAD33

pBad/Myc-His A

pSP73

pCold-GST

pAmCyan

PinPoint Xa-2

pTXB1

pET-52b(+)

pColdS-SUMO

pTWIN1

pBad/gIII A

pET-23d(+)

pCold II

pET-24a(+)

pkk223-3

pET-29a(+)

pBAD102/D-TOPO

pET-28a(+)

pBAD18

pET-30 EK/LIC

pBad/Myc-His C

pProEX HTc

pET-44 EK/LIC

pET-32 Xa/LIC

pBad/His B

pMal-p2E

pTrcHis B

pET-40b(+)

pET-23a(+)

pQE-60

pGEX-3X

pET-45b(+)

pET-12c(+)

pQE-32

pTrc99a

pMal-c2E

pET-11c(+)

pBad24

pACYC177

pGEX-5X-1

pQE-80L

pET-12a(+)

pMXB10

pGEX-6P-3

pQE-31

pET-23c(+)

pGEX-KG

pTrcHis A

pET-51b(+)

pBad/His A

pTrcHis C

pGEX-2T

pET-47b(+)

pBad/Myc-His B

pET-3a(+)

pEcoli-6xHN-GFPuv

pET-22b(+)

pBAD202/D-TOPO

pGEX-5X-3

pBR322

pET-19b

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pET-32 EK/LIC

pET-28b(+)

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pET-30 Xa/LIC

pGEX-4T-2

pET-25b(+)

pQE-81L

pET-29b(+)

pET-31b(+)

pET-42a(+)

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pGEM-T

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pTrcHis2 C

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pET-SUMO

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pET-21b(+)

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PinPoint Xa-3

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pBluescript II KS(-)

pMAL-p5e

pMAL-p5x

pET-43.1a(+)

pEGM-11ZF(+)

pTYB2

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pDsRed-Express2

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pET303/CT-His

pBV221

pSUMO

pTYB1

pRSET-BFP

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