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K599感受态细胞,K599感受态细胞,K599菌

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                   K599Chemically Competent Cell

   K599产品规格 10*100ul (货号:huayueyang728s)

   K599产品规格 50*100ul (货号:huayueyang728B)          

   K599 Chemically Competent Cell 产品说明书

产品规格

K599 Competent Cell:                                            100μl/支

pCAMBIA2301(control vector, 10ng/μl)                         10μl

保存条件(保质期):                                         -80℃(12个月)

基因型

 Agrobacterium rhizogenes (strR ) pRi2659 (agropine type)

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发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599发根农杆菌(NCPPB2659)含有pRi2659农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。华 越洋的K599化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测,转化效率>103 cfu/μg DNA。

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常规操作方法

1.取-80℃保存的K599发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。

2.  每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。

3. 冰浴中拿出放室温,加入700μl 无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2小时。

4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3 天

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