RNA样品DNA清除剂,RNA溶液DNA清除剂
RNA样品DNA清除剂,RNA溶液DNA清除剂
RNA样品DNA清除剂
组分:
DNase 350μl ×2
DNase buffer 1.5ml ×4
去蛋白液 15ml ×2
去酶液 50ml ×2
RNA洗脱液 10ml ×2
操作步骤:
1、配制DNA消化酶工作液:取7μlDNase加入离心管中,再加入43μl的DNase buffer, 混合成DNA消化酶工作液。
2、取50μlRNA样品在RNasefree的离心管中,往其中加入上述配制DNA消化酶,静止5-10分钟。
3、分别往其中加入100μl去蛋白液和100μl氯仿,简单混匀,12000R离心3-5分钟。
4、取上清入新的干净离心管中,再往其中加入等体积异丙醇,12000R离心3-5分钟,倒掉上清液。
5、往离心管中加入200μl去酶液漂洗管底的RNA沉淀,12000R离心1分钟,倒掉乙醇。
6、将管底附着RNA沉淀的离心管放入干净环境,让残留乙醇挥发,晾干。此步骤十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA后续实验。最后再用50μl RNA洗脱液溶解RNA沉淀,既得无DNA残留的RNA溶液。
注意事项:
上述实验结果会因操作手法因素,变化很大,如果RNA样本珍贵,用户可简单做个预实验,能达到理想效果后再大批量进行RNA溶液DNA清除。