GV2260感受态细胞

GV2260感受态细胞，GV2260感受态细胞 

货号：CAT:2548-100          规格：20*100ul, 农杆菌,化学转化

货号：CAT:2548e-100          规格：10*50ul, 农杆菌,电转化

基因型：
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基本信息：抗性：Rif

培养基：YEB

菌株类别：农杆菌

培养条件：28℃，有氧，YEB

质粒转化：电转、化转

保存方式：30%甘油，-20℃

基本应用：转基因

GV2260感受态细胞操作方法（采用冻融法）：

1.        取-80℃保存的GV2260农杆菌感受态细胞于冰上或室温融化。

2.        在无菌条件下，向刚刚化冻的感受态细胞悬液中加入1μg需要转化的质粒DNA，轻轻混匀，冰水浴中静置10min。

3.        将离心管置于液氮中速冻5min。（也可以用干冰和无水乙醇混合物代替液氮）

4.        快速将离心管置于37℃水浴中保持5min，不要晃动水面。

5.        将离心管放回冰水浴中，再保持5min。

6.        无菌条件下加入800μl无抗生素的2×YT或LB液体培养基，于28℃震荡培养2~3小时。目的是使菌体复苏并表达抗生素抗性。

7.        5000rpm离心1min收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌体，加到相应抗生素的LB固体培养基平板上，用无菌的细菌涂布器或玻璃珠将细胞均匀涂开。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28℃培养2-3天。

 GV2260感受态细胞

注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量

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