BL21 Gold pLysS(DE3)化学感受态细胞
BL21 Gold pLysS(DE3)化学感受态细胞
BL21 Gold pLysS(DE3) Chemically Competent Cell
编号 | 名称 | 规格 | 单位 |
北京华越洋WG3699s | BL21 Gold pLysS(DE3) | 10×100ul | 包 |
北京华越洋WG3699 | BL21 Gold pLysS(DE3) | 20×100ul | 包 |
BL21 Gold pLysS(DE3)化学感受态细胞基本信息：
BL21 Gold pLysS(DE3)基因型:
E. coli B F- dcm+ Hte ompT hsdS(rB- mB-) gal λ (DE3) [pLysS Camr]a endA Tetr
BL21 Gold pLysS(DE3)菌株介绍：
BL21 and BL21-Gold-derived competent cells are designed for high-level protein expression using T7 RNA polymerase-based expression systems.‡‡ The BL21(DE3)pLysS and BL21-Gold(DE3)pLysS competent cells provide tighter control for expression of toxic proteins. When used with the CE6 bacteriophage, the BL21 and BL21-Gold cells provide the tightest control of protein expression, important for extremely toxic proteins. In addition, the BL21 and BL21-Gold cells can be used for non-T7 RNA polymerase protein expression systems. All BL21 strains are deficient in the OmpT and Lon proteases, which may interfere with isolation of intact recombinant proteins. Use the BL21 or the BL21-Gold competent cells and its derivatives with T7 promoter-driven vectors, such as the Affinity® pCAL vectors and pET vectors.
BL21 Gold pLysS(DE3)使用说明:
1. 本产品采用干冰运输，收到后请直接冻存于-80℃冰箱。
2. 取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化；
3. 加入1μl纯质粒，轻轻吹打混匀，冰浴30min；
4. 将菌液放入42℃水浴中热激45sec，立即放入冰浴中2min；
5. 加入900μl SOC/LB培养基，于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育；
6. 将菌液5000rpm×5min离心，弃尽上清；
7. 取100μl新鲜LB培养基将菌体打散，均匀涂布于对应抗性平板表面；
8. 平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕，再倒置37℃培养过夜。
BL21 Gold pLysS(DE3)注意事项:
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
3. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作，感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
4. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板； 若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
5. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
6. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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