脂质体2000 Lipo2000转染试剂/invitrogen 11668027/11668019

【性能参数】

产品名称： 脂质体2000

英文名称： Lipofectamine 2000 Reagent

产品货号： 11668-027/11668-019

产品规格： 0.75mL/1.5mL

产品产地： 美国

产品商标： invitrogen 

保存与运输： 4℃

现货状态： 现货

详细资料： 实验方法技术资料 

    此类产品水货很多，请客户不要相信低价的诱骗。

Lipofectamine 2000转染试剂是一种多用途转染试剂，可在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染。

研究人员可使用Lipofectamine 2000试剂进行基于siRNA和shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和质粒DNA共转染的最佳试剂。


采用Lipofectamine 2000试剂，您可以实现：

在各种细胞系中具有卓越的转染效率和高重组蛋白表达水平 (表1)

出众的siRNA和质粒DNA共转染性能

在血清存在时亦具有可靠的转染效率 – 转染后无需更换培养基

适用于高通量应用的可靠性能

建立稳定细胞系的最佳选择


适用于基因表达和基因沉默的高性能转染试剂

Lipofectamine 2000试剂适合所有常见细胞系及许多难以转染的细胞系，可用于含有或不含

血清的培养基。在基因沉默应用中，Lipofectamine 2000试剂的高效转染提供了很高的基因敲除水平，

足以获得令人信服的结果。Lipofectamine 2000试剂可实现siRNA和质粒DNA的高效转染，它是共转染的

首选试剂。Lipofectamine 2000试剂使用方便 – 只需将其与核酸混合，加入细胞培养物即可。


适合高通量操作

Lipofectamine 2000试剂使用简单、快速且具有很高的转染效率，适用于瞬时蛋白表达或

高通量RNAi转染。在上述应用中，可轻松建立自动化或机器人系统转染条件。如需了解有关

Lipofectamine 2000的实验方案、文献引证及其它产品信息，可登录细胞系数据库。


仅供研究使用。不得用于人或动物的治疗或诊断。

Lipofectamine 2000转染试剂是一种多用途转染试剂，可在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染。

研究人员可使用Lipofectamine 2000试剂进行基于siRNA和shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和质粒DNA共转染的最佳试剂。


脂质体2000 描述

脂质体2000是专门用于将核酸转染进入真核细胞的一种形式我们提供下列的建议

在多种细胞和培养板中都有很高的转染效率。在网上列出的细胞类型中都获得了较高的转染效率。 核酸-脂质体2000的复合物可以直接加入到细胞培养液中无论是有血清还是无血清的情况。 转染之后不用移除复合物或者更换培养液但是复合物应在转染后4-6h移除。 转染的一些重要指导 DNA转染使用page3 我们建议使用Opti-MEM I reduced serum  培养基来稀释脂质体2000和核酸。 转染时不要向培养基中加入抗生素。 在实验过程中要保持一样的条件  

DNA转染 使用下列方法

在24孔板内转染DNA进入哺乳动物细胞。对于其他的板子可以参考page4.所有的数量和体积都是基于一个孔的剂量。准备复合物使DNAug脂质体ul的比例为1:2到1:3。转染时细胞密度较高可以获得高的效率高的表达水平以及使毒性降低。条件的选择很重要。

1. 贴壁细胞在转染前一天向24孔板内接种0.5-2*105个细胞使得细胞在转染时融合率达到90-95%。切记使用不含抗生素的培养基。

2. 对于每一个转染样品按照如下方法准备复合物 A 使用无血清的培养基将DNA稀释为50ul温和混匀。 B 使用前混匀脂质体2000然后用培养基将一定量的脂质体2000稀释为50ul。室温孵育5min。 进行到c时间不超过25min     C5min的孵育后混合稀释的DNA和稀释的脂质体2000总体积为100ul。温和混匀室温孵育20min溶液呈现云雾状.混合物在室温可稳定存在6h。

3. 向含有细胞和培养液的板子中每孔加入100ul的复合物通过敲打板子和来回晃动使其混合均匀。

4. 细胞孵育18-48h后可检测转染情况。培养液可在转染4-6h后更换。

5. 对稳定的细胞系传代细胞在转染后以1:10的比例加入新鲜的培养液。第二天加入选择培养基。  优化转染 为了获得高的转染效率和低毒性通过调整细胞浓度和DNA:脂质体2000的比例来优化转染条件。确保细胞90%的融合以及DNA(ug)脂质体ul比例在1:0.5到1:5。   转染条件的浮动   转染到不同类型的培养板中脂质体2000的核酸的量细胞数以及合适的培养基量都在下表中显示。在96孔板中建议总体积到50ul