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BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受态细胞

BL21-CodonPlus (DE3)-RIL@感受态细胞BL21-CodonPlus (DE3)-RIL Chemically Competent Cell

 BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受态细胞

BL21-CodonPlus (DE3)-RIL Chemically Competent Cell

 CAT :WG14695    保存条件: -80℃

产品规格BL21-CodonPlus(DE3)-RIL  10×100μl

基因型:FompT hsdS(rB– mB–) dcm+ galλ(DE3) endA Hte [argU ileY leuW Camr ]

BL21-CodonPlus(DE3)-RIL 菌株来源于 Stratagene 公司的 BL21-Gold 菌株,缺少 Lon 蛋白酶和 OmpT 蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的 4 种稀有密码子( AGAAUA CCCCUA) 对应的 tRNA argUileYleuW),提高外源基因,尤其是富含 AT- GC-的真核基因在 原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区(DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶), 可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,可用于 pET 系列,pGEXpMAL 等质粒的蛋白表 达,具有氯霉素抗性。BL21- Codon Plus(DE3)-RIL 感受态细胞由特殊工艺制作,经 pUC19 质粒检测转

化效率高达 108cfu/μg

BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受态细胞 

使用方法

1. 100μl 冰上融化的 AngYuBio BL21-CodonPlus(DE3)-RIL 感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,

冰上静置 25 分钟。

2. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌 2YT LB 培养基,混匀后 37℃,200rpm 复苏 60 分钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌,留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT

LB 培养基上。

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。

 BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受态细胞 

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG 浓度可选(0.1-2mM 均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG 浓度需实验者优化。

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