YPDplus，YPDplus培养基
YPDplus，YPDplus培养基
YPDplusmedium， YPD Plus Liquid Medium
品名 | 规格 | 单位 | 品牌 | 当日秒杀价 | 货号 |
YPDplus | 5*50ml | 瓶 | huayueyang | 1450元 | C361-50B |
YPDplus | 50ml | 瓶 | huayueynag | 390元
| C322-50 |
YPDplus说明：本产品经高压灭菌处理，为方便使用，短期可密封置于超净台常温保存。为了避免污染，长时间放置请于低温冰箱保存。
YPDplus，YPDplus培养基
产品说明：
用LiAc转化法进行酵母转化时，通常会通过加入Carrier DNA，选用对数期的酵母菌，以及优化质粒DNA的质量和浓度等方法来提高转化效率。在完成转化操作后，将转化产物用YPD Plus Liquid Medium重悬培养30-60分钟，有助于酵母细胞复苏，可以有效提高转化效率50-100%。适用于转化酵母菌株Y2HGold、AH109或Y187等，尤其适合对转化效率要求更高的文库转化。
Huayueyang推出的三款转化试剂盒，转化效率为：经典转化Kit（SK2400）≈Super转化Kit（SK2401）＞快速转化Kit（SK2390），其中经典转化Kit转化效率可达103-105 cfu/μg，快速转化Kit转化效率可达经典转化效率的50-80%，转化产物增加YPD Plus复苏培养步骤，会在此基础上显著增加转化效率。三款转化试剂盒的区别与特点详见huayueyang官网。
YPDplus，YPDplus培养基方法：
YPDplus质粒转化：
1. 在含有约1 μg质粒的1.5 mL无菌离心管中，加入5 μL预变性的Carrier DNA（YT0003），50 μL酵母感受态细胞，350 μL LiAc / PEG3350混合液（YT0006）轻柔混匀。
2. 30 ℃水浴或者金属浴30 min，每10 min轻柔上下颠倒混匀一次。
3. 每管加入20 μL DMSO，轻柔上下颠倒混匀。
4. 42 ℃水浴热激15 min，每5 min轻柔上下颠倒混匀一次。
5. 3,000 rmp离心5 min，弃掉上清。
6. 菌体沉淀用1 mL YPD Plus Liquid Medium重新悬浮，30 ℃摇床震荡培养30-60 min。
7. 3,000 rmp离心5 min，弃掉上清，加入1 mL无菌0.9% NaCl重悬菌体。
8. 分别稀释10倍，100倍后涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
9. 平板倒置30 ℃恒温培养3-5天。
文库转化：
1.在含有约5-15 μg文库质粒的15 mL无菌离心管中，加入20 μL预变性的Carrier DNA，600 μL酵母感受态细胞，2.5 mL LiAc / PEG3350混合液轻柔混匀。
2.30℃水浴45 min，每10 min轻柔上下颠倒混匀一次。
3.每管加入160 μL DMSO，轻柔上下颠倒混匀。
4.42 ℃水浴热激20 min，每5 min轻柔上下颠倒混匀一次。
5.3,000 rmp离心5 min，弃掉上清。
6.菌体沉淀用3 mL YPD Plus Liquid Medium重新悬浮，30 ℃摇床震荡培养90 min。
7.3,000 rmp离心5 min，弃掉上清，根据实验需求加入相应体积的无菌0.9% NaCl重悬菌体。
8.涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
9.平板倒置30 ℃恒温培养3-5天。
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