KM71毕赤酵母感受态细胞 KM71酵母菌株
KM71毕赤酵母感受态细胞
KM71感受态细胞,KM71酵母菌株
KM71 Chemically Competent Cell
货号 名称 规格 数量
GT2503s KM71 酵母感受态细胞 100ul 10支
GT2503 KM71 酵母感受态细胞 100ul 20支
GT2503B KM71 酵母感受态细胞 100ul 50支
KM71毕赤酵母感受态细胞KM71感受态细胞
KM71 感受态说明书
KM71 : 100μl/支 保存:-80℃(3 个月)
CarrierDNA(10μg/μl) 50μl 保存:-20℃(3 个月)
毕赤酵母转化液: 5ml 保存: 4℃(3 个月)
KM71毕赤酵母PEG感受态细胞 转化步骤
1. 取需转化质粒 5µg,酶切,回收;
2. 取一支无菌的 1.5mlEP 管,依次加入预冷的线性质粒 1-5µg(体 积不高于 15µl),Carrier DNA5µl,100µl 冰上融化的 KM71 感受态细胞,毕赤酵母转化液 500µl,轻轻翻转混匀 6-8 次; 3.30℃水浴 30min,每 10min 轻轻翻转混匀 6-8 次;
4每支加入 20µl 的二甲基亚砜;
5 42℃水浴 15min,每 5min 轻轻翻转混匀 6-8 次;
6.12000rpm 瞬时离心弃上清,每支加 1ml 的 YPG 于 30℃复苏 1h;
7.12000rpm 瞬时离心弃上清,用 100µl0.9%NaCl 重悬,涂板, 30℃ 培养 48-96h。
KM71毕赤酵母PEG感受态细胞 注意事项
1. 使用 CarrierDNA 前,请把装有 CarrierDNA 的管子在沸水中煮 沸 5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃储存备用。 2. 转化液低温环境下会析出,请于常温下完全溶解后使用。 3. 转化全程要无菌操作。
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