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KM71毕赤酵母感受态细胞 KM71酵母菌株

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KM71毕赤酵母感受态细胞

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KM71 Chemically Competent Cell

 货号     名称            规格      数量   

GT2503s  KM71 酵母感受态细胞   100ul 10  

GT2503   KM71 酵母感受态细胞  100ul 20     

GT2503B  KM71 酵母感受态细胞   100ul 50

KM71毕赤酵母感受态细胞KM71感受态细胞

KM71  感受态说明书

KM71  100μl/       保存:-80℃(3 个月)

CarrierDNA(10μg/μl) 50μl 保存:-20℃(3 个月)

 毕赤酵母转化液:       5ml 保存: 4℃(3 个月)

KM71毕赤酵母PEG感受态细胞 转化步骤

1. 取需转化质粒 5µg,酶切,回收;

2. 取一支无菌的 1.5mlEP 管,依次加入预冷的线性质粒 1-5µg(体 积不高于 15µl),Carrier DNA5µl100µl 冰上融化的 KM71 感受态细胞,毕赤酵母转化液 500µl,轻轻翻转混匀 6-8 次; 3.30℃水浴 30min,每 10min 轻轻翻转混匀 6-8 次;

4每支加入 20µl 的二甲基亚砜;

5 42℃水浴 15min,每 5min 轻轻翻转混匀 6-8 次;

6.12000rpm 瞬时离心弃上清,每支加 1ml YPG 30℃复苏 1h

7.12000rpm 瞬时离心弃上清,用 100µl0.9%NaCl 重悬,涂板, 30℃ 培养 48-96h

KM71毕赤酵母PEG感受态细胞 注意事项

1. 使用 CarrierDNA 前,请把装有 CarrierDNA 的管子在沸水中煮 沸 5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃储存备用。 2. 转化液低温环境下会析出,请于常温下完全溶解后使用。 3. 转化全程要无菌操作。

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