ACCC10060农杆菌感受态细胞

ACCC10060感受态细胞

货号          规格          单位

                    TT110             10*100UL            包

如果遇到Accc10060的转化效率低的情况，建议转化的时候可以适当增加摇菌时间以及涂板的菌液

ACCC10060农杆菌感受态细胞
操作方法（采用冻融法）：

1.      取-80℃保存的ACCC10060农杆菌感受态细胞于冰上或室温融化。

2.      在无菌条件下，向刚刚化冻的感受态细胞悬液中加入1μg需要转化的质粒DNA（一般质粒溶液体积为感受态的十分之一），轻轻混匀，冰水浴中静置10min。

3.      将离心管置于液氮中速冻5min。（也可以用干冰和无水乙醇混合物代替液氮）

4.      快速将离心管置于37℃水浴中保持5min，不要晃动水面。

5.      将离心管放回冰水浴中，再保持5min。

6.      无菌条件下加入800μl无抗生素的LB液体培养基，于28℃震荡培养2~3小时。目的是使菌体复苏并表达抗生素抗性。

7.      5000rpm离心1min收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌体，加到LB固体培养基平板上，用无菌的细菌涂布器或玻璃珠将细胞均匀涂开。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28℃培养2-3天。

ACCC10060农杆菌感受态细胞

注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量

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