全能核酸酶
全能核酸酶
Benzonase Nuclease
产品货号 | 产品名称 |
北京华越洋生物GT597 | 全能核酸酶 |
全能核酸酶产品说明:
全能核酸酶,又称广谱核酸酶,英文名称Benzonase Nuclease,一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
本产品由经基因工程改造的真核生物酵母菌表达纯化所得,不含原核生物表达体系自身的细菌内毒素,不仅应用在科研研究中,作为培养细胞上清和细胞裂解液去粘度的首选酶制剂,去除核酸干扰提高后续蛋白纯化或功能研究;而且应用在疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业,去除宿主残留核酸,大大降低疫苗和蛋白类产品核酸污染至皮克级别,提高制品生物功效。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20mM Tris-Cl pH8.0,2mM MgCl2,2mM NaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
全能核酸酶产品性质:
英文别名(English Synonym) | BenzNuclease; Universal Nuclease; Benzonase endonuclease |
CAS号(CAS NO.) | 9025-65-4 |
分子量(Molecular Weight) | 27.9 kDa |
纯度(Purity) | ≥90%(SDS-PAGE) |
酶活(Enzyme Activity) | ≥250 U/μL |
比活(Specific Activity) | ≥1.0×106 U/mg蛋白 |
蛋白酶(Protease) | |
内毒素(Endotoxin) | Undetected(鲎试剂法) |
最适pH(Optimum pH) | |
最适温度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范围0-42℃) |
辅助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
储存缓冲液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-Cl pH8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,50%甘油 |
稀释缓冲液(Dilution Buffer) | 20 mM Tris-Cl pH8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl |
活性单位定义(Unit Definition) | 在37℃,pH 8.0反应条件,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。 |
全能核酸酶使用方法
1) 细胞处理:a.贴壁细胞去除培养基,用PBS洗后,1 mL RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加10-20 uL全能核酸酶,室温或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
b.悬浮细胞离心收集后,在离心管中加1 mL RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加10-20 uL全能核酸酶,室温或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
2) 组织样品:将30-100 mg动物或者植物组织研磨充分后,加入100-200 uL裂解液,同时加入加5-10 uL全能核酸酶,室温或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
3) 大肠杆菌或者其他细菌:细菌离心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每1 mL加1-5 uL全能核酸酶,室温孵育30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
注:若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶量或孵育时间。