SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞

SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞

SH-SY5Y 人神经母细胞瘤细胞特点： 

活性好

存活率高

实验成果特征明显

SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞处理方法：
一、贴壁细胞

1.        接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行丌同倍数
拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。

2.        用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。

3.        严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。

4.        37度平衡1-2小时。

5.        用移液管吸取培养基，到50ml离心管中，剩下细胞密度达到90%可以传代，如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。

6.  如果肉眼检查上清有细胞，对50ml上清进行离心收集细胞，如果细胞连片状态，弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化（1ml胰酶37度），接种培养

二、悬浮细胞

1.        接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行丌同倍数拍
照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张）。

2.        用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。

3.        严格遵循无菌操作规范，打开细胞培养瓶。

4.        细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。

5.        1000rpm，5min 离心，用吸管小心吸出上清，加入培养基，重悬细胞。

6.  将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种，加入新鲜培养基，置于 37℃，5%CO2 培养。

SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞培养应注意的问题：       

细胞培养过程中，从实验室的设计到实验过程中的操作，都需要严格控制无菌。由于细胞对于生长的条件比较苛刻，所以无论从实验室的设计，还是使用的物品及细胞培养的操作过程，都要注意保持无菌环境。

SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞冷冻保存方法：
冷冻保存方法一:

冷冻管置于4°C30~60分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。 

冷冻保存方法二:

冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。