大鼠肝Kupffer细胞

大鼠肝Kupffer细胞

    为能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

  派瑞金提供的大鼠肝Kupffer细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。研发的大鼠肝Kupffer细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
  同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

大鼠肝 Kupffer 细胞简介:
1. 名称：大鼠肝 Kupffer 细胞（Rat Hepatic Kupffer Cells）
2. 组织来源：大鼠肝组织
3. 规格：5×10⁵cells/25cm² 培养瓶
4. 细胞简介：
  大鼠肝 Kupffer 细胞分离自大鼠肝脏组织，细胞呈圆形或多角形。Kupffer 细胞是位于肝窦内表面的吞噬细胞，能够清除血液中的外来抗原、抗原－抗体复合物和细胞碎片等物质。Kupffer 细胞是全身单核-吞噬细胞系统的重要组成部分，也是肝脏防御系统主要成员，在全身和肝脏疾病发生发展中起到重要作用。
  本公司生产的大鼠肝 Kupffer 细胞采用混合酶灌流消化并密度梯度离心制备而来，细胞总量约为 5×10⁵ 个/瓶，细胞经 CD68 鉴定纯度可达 85%以上，且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5. 培养基信息：

1）基本培养基：DMEM/F12
2）添加因子：FBS、Insulin、Dexamethasone、Selenium、 Transferrin、ratEGF、Penicillin、Streptomycin 等。

大鼠肝 Kupffer 细胞使用方法:
收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO₂ 培养箱中静置 6-8 小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. Kupffer 细胞为终末分化的细胞，建议直接使用，不建议扩大培养。且传代后细胞的吞噬活性会大大降低。
3. 待细胞状态最佳时准备转孔培养，进行实验：
1) 吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。
2) 加入 0.125%的弹性蛋白酶消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按适当的比例进行转孔培养实验，放入 37℃，5% CO₂细胞培养箱中培养。
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的完全培养基。

大鼠肝 Kupffer 细胞注意事项:
1. 培养基于 4℃条件下可保存 3-6 个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 该细胞只可用于科研。
备注：由于实验所用试剂与操作环境的不同，以上方法供各实验室参考。

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