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JM108感受态细胞

JM108化学感受态细胞

JM108感受态细胞

JM108 Chemically Competent Cell

 

编号

名称

规格

单位

北京华越洋WG954662s

JM108

10×100ul

北京华越洋WG954662

JM108

20×100ul

 

JM108化学感受态细胞基本信息:

JM108基因型:

endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (rK- mK+)

 

JM108菌株介绍

nalidixic acid resistant.
deficient in expression of the lon protease due to IS186 transposon insertion.

 

JM108使用说明

1.         本产品采用干冰运输,收到后请直接冻存于-80℃冰箱。

2.         取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化;

3.         加入1μl纯质粒,轻轻吹打混匀,冰浴30min

4.         将菌液放入42℃水浴中热激45sec,立即放入冰浴中2min

5.         加入900μl SOC/LB培养基,于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育;

6.         将菌液5000rpm×5min离心,弃尽上清;

7.         100μl新鲜LB培养基将菌体打散,均匀涂布于对应抗性平板表面;

8.         平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕,再倒置37℃培养过夜。

 

JM108注意事项

1.         为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.         本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。

3.         混入质粒或连接产物时应轻柔操作,感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

4.         涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。

5.         新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养.

6.         涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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