BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受态细胞
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Chemically Competent Cell
编号 | 名称 | 规格 | 单位 |
北京华越洋WG14696s | BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL | 10×100ul | 包 |
北京华越洋WG14696 | BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL | 20×100ul | 包 |
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受态细胞基本信息：
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 基因型:
F–ompT hsdS(rB–mB–) dcm+ Tetr galλ(DE3) endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuW Strep/Specr]
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL产品介绍：
BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子 (AGA, AUA, CCC, CUA)对应的tRNA (argU, ileY, proL, leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，链霉素，壮观霉素抗性。BL21- CodonPlus(DE3)-RIPL 感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率高达108 cfu/µg DNA。
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL使用说明
1. BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT 或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
华越洋其他感受态细胞：
OrigamiB,OrigamiB(DE3),OrigamiB(DE3)pLysS,OrigamiB(DE3)pLacI | |
