北京华越洋生物
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PGAPZαA

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编号

载体名称

北京华越洋VECT75526

pGAPZαA

 

pGAPZαA载体基本信息:

启动子:

GAP

复制子:

pUC ori

终止子:

AOX1 TT

质粒分类:

酵母系列,毕赤酵母表达载体

质粒大小:

3147bp

质粒标签:

C-Myc, C-6×His

原核抗性:

Zeo

筛选标记:

HIS4

克隆菌株:

DH5α

培养条件:

37℃,有氧 LB

表达宿主:

酵母细胞

5'测序引物:

pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA

3'测序引物:

AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT

 

pGAPZαA载体图谱:


pGAPZαA载体简介:

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母,稳定高水平表达。最近GAPDH蛋白编码基因启动子(GAP)被深入研究,并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白,这取决于使用的碳源(Waterham等 人,,1997)。GAP启动子(PGAP)的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
   pGAPZ A,B,和C载体(2.9 KB)和pGAPZαB和C(3.1 KB)载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外,pGAPZα 表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体,以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。  

 

pGAPZαA载体序列:

ORIGIN

        1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat

       61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa

      121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc

      181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc

      241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc

      301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga

      361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt

      421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac

      481 tatttcgaaa cgatgagatt tccttcaatt tttactgctg ttttattcgc agcatcctcc

      541 gcattagctg ctccagtcaa cactacaaca gaagatgaaa cggcacaaat tccggctgaa

      601 gctgtcatcg gttactcaga tttagaaggg gatttcgatg ttgctgtttt gccattttcc

      661 aacagcacaa ataacgggtt attgtttata aatactacta ttgccagcat tgctgctaaa

      721 gaagaagggg tatctctcga gaaaagagag gctgaagctg aattcacgtg gcccagccgg

      781 ccgtctcgga tcggtacctc gagccgcggc ggccgccagc tttctagaac aaaaactcat

      841 ctcagaagag gatctgaata gcgccgtcga ccatcatcat catcatcatt gagttttagc

      901 cttagacatg actgttcctc agttcaagtt gggcacttac gagaagaccg gtcttgctag

      961 attctaatca agaggatgtc agaatgccat ttgcctgaga gatgcaggct tcatttttga

     1021 tactttttta tttgtaacct atatagtata ggattttttt tgtcattttg tttcttctcg

     1081 tacgagcttg ctcctgatca gcctatctcg cagctgatga atatcttgtg gtaggggttt

     1141 gggaaaatca ttcgagtttg atgtttttct tggtatttcc cactcctctt cagagtacag

     1201 aagattaagt gagaccttcg tttgtgcgga tcccccacac accatagctt caaaatgttt

     1261 ctactccttt tttactcttc cagattttct cggactccgc gcatcgccgt accacttcaa

     1321 aacacccaag cacagcatac taaattttcc ctctttcttc ctctagggtg tcgttaatta

     1381 cccgtactaa aggtttggaa aagaaaaaag agaccgcctc gtttcttttt cttcgtcgaa

     1441 aaaggcaata aaaattttta tcacgtttct ttttcttgaa attttttttt ttagtttttt

     1501 tctctttcag tgacctccat tgatatttaa gttaataaac ggtcttcaat ttctcaagtt

     1561 tcagtttcat ttttcttgtt ctattacaac tttttttact tcttgttcat tagaaagaaa

     1621 gcatagcaat ctaatctaag ggcggtgttg acaattaatc atcggcatag tatatcggca

     1681 tagtataata cgacaaggtg aggaactaaa ccatggccaa gttgaccagt gccgttccgg

     1741 tgctcaccgc gcgcgacgtc gccggagcgg tcgagttctg gaccgaccgg ctcgggttct

     1801 cccgggactt cgtggaggac gacttcgccg gtgtggtccg ggacgacgtg accctgttca

     1861 tcagcgcggt ccaggaccag gtggtgccgg acaacaccct ggcctgggtg tgggtgcgcg

     1921 gcctggacga gctgtacgcc gagtggtcgg aggtcgtgtc cacgaacttc cgggacgcct

     1981 ccgggccggc catgaccgag atcggcgagc agccgtgggg gcgggagttc gccctgcgcg

     2041 acccggccgg caactgcgtg cacttcgtgg ccgaggagca ggactgacac gtccgacggc

     2101 ggcccacggg tcccaggcct cggagatccg tccccctttt cctttgtcga tatcatgtaa

     2161 ttagttatgt cacgcttaca ttcacgccct ccccccacat ccgctctaac cgaaaaggaa

     2221 ggagttagac aacctgaagt ctaggtccct atttattttt ttatagttat gttagtatta

     2281 agaacgttat ttatatttca aatttttctt ttttttctgt acagacgcgt gtacgcatgt

     2341 aacattatac tgaaaacctt gcttgagaag gttttgggac gctcgaaggc tttaatttgc

     2401 aagctggaga ccaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc

     2461 gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc

     2521 tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga

     2581 agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt

     2641 ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcaa tgctcacgct gtaggtatct cagttcggtg

     2701 taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc

     2761 gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg

     2821 gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc

     2881 ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact agaaggacag tatttggtat ctgcgctctg

     2941 ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc

     3001 gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct

     3061 caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt

     3121 taagggattt tggtcatgca tgagatc

//

 

 

pGAPZαA载体其他相关的毕赤酵母过表达载体:

pYM39-EYFP
pYM33-EBFP
pYM30-ECFP
pPICZαC
pPICZαB
pPICZαA
pPICZC
pPICZB
pPICZA
pGAPZαC
pGAPZαB
PGAPZαA
pGAPZC
pGAPZB
pGAPZA