杀稻瘟菌素Blasticidin

杀稻瘟菌素Blasticidin

BSD基因筛选抗生素

（进口，实验室级别，无内毒素，无菌，无核酸酶污染）

杀稻瘟菌素Blasticidin介绍:

Blasticidin是从Streptomyces griseochromogenes（灰色链霉菌）产生的一种肽基核苷抗生素，Blasticidin主要通过干扰核糖体中肽键的形成从而抑制原核细胞和真核细胞蛋白的合成。 Blasticidin用于选择筛选携带bsr或BSD基因的转染细胞。

杀稻瘟菌素Blasticidin化学特性：

CAS号：3513-03-9                                             

分子式：C₁₇H₂₆N₈O₅           

分子量：458.9

pKa值：2.8, 4.2, 8.2 和12.5

大肠杆菌对Blasticidin不敏感，但有Blasticidin抗性的转化子可以在低盐LB琼脂糖培养基，pH8,100ug/ml Blasticidin的条件下筛选。高pH可增强Blasticidin的活性。

哺乳动物细胞

细胞系  种属  组织  培养基  Blasticidin(ug/ml)

Hela  human  uterus  DMEM  3-10

293  human  kidney  DMEM  3-10

B16  mouse  melanoma  RPMI  3-10

PC1.0  hamster  adenocarcinoma  RPMI  10-30  

杀稻瘟菌素Blasticidin质量控制：

纯度>95%(HPLC)

经细菌和哺乳动物细胞系鉴定活性 

杀稻瘟菌素Blasticidin运输及保存：

4℃或-20℃保存2年，避免反复冻融。

实验步骤

1.       哺乳动物细胞中Blasticidin 的工作浓度范围在1-50 ug/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

2.       转染48h后，换含适当浓度Blasticidin的新鲜培养基。

3.       每隔3-4天换液，更换的培养基为含相同浓度Blasticidin的新鲜培养基。

4.       筛选7天后，评估剩余存活细胞是否全部为转染成功克隆。另外，这些克隆的筛选时间主要依赖于宿主细胞系种类和转染筛选效率。

5.       筛选出的转染成功克隆用选择培养基培养7天，再进行后续实验。

杀稻瘟菌素Blasticidin注意事项

1．  Blasticidin是一种有危害的化合物。避免接触眼睛，皮肤和衣服。

2．  需加抗生素筛选的细胞，应为生长状态良好的细胞。另外，如果细胞密度过大将会影响筛选效率，因此，接种细胞的汇合度应不超过25%。