白蛋白检测试剂盒
白蛋白检测试剂盒（溴甲酚紫微板法）
白蛋白检测试剂盒 CAT:huayueyang0991
储存条件：2-8℃保存。
注：开盖后组分按要求条件保存；白蛋白标准配制成溶液后应尽快使用或-20℃冻存。
白蛋白检测试剂盒
注意事项：
● 本试剂盒仅供科学研究使用。（不可用于诊断或治疗用途，不可用于食品或化妆品用途）
● 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
白蛋白检测试剂盒产品组成：
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产品名称 |
100T |
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试剂A:BCP储备液 |
0.1ml |
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试剂B:白蛋白标准储备液（200mg/ml） |
0.1ml |
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试剂C:BCP空白试剂 |
30ml |
白蛋白检测试剂盒产品简介：
总蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法，其中检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比。
白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol purple，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度，可用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的白蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比 BCG 法(溴甲酚绿法)要好，不易受时间和温度变化的影响。
试剂盒以外自备试剂和仪器
仪器准备 ： ● 酶标仪
试剂准备： ● 纯水、生理盐水或PBS
耗材准备： ● 离心管/小试管、96孔板
白蛋白检测试剂盒
使用方法：
使用注意事项:
●螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
●严重脂血对测定有干扰，应加做标空白予以校正；
●如果没有酶标仪，也可以用分光光度计测定，使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数会显著减少;
●本试剂盒的线性范围为4-80g/L;
●该法测定正常样本的批间变异系数为 6.3%。
●CV 可达 0.45%，回收率可达 99.3~102%，平均回收率达100.5%;
●经华越洋测定白蛋白标准溶液(40mg/ml)其吸光度减去空白吸光度差值在 0.15~0.4之间;如果样品浓度过低，可能导致样品吸光度与标准孔吸光度之间差异不大，其避免方法为:增加标准品和(或)待测样品的量以提高差异性，可使标准品和(或)待测样品从1.4ul增加至5ul之间的量。
其计算公式应调整为:白蛋白浓度(g/L)= (A样品/A标准)X白蛋白标准溶液浓度(g/L)X(1.4/实际加入样品微升数)
●白蛋白标准配制成溶液后应尽快使用或-20℃冻存。
样本处理：
1.血清、血浆样本: 按常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，取 1.4ul检测;
2.组织样本:按组织重量(g):生理盐水或 pbs (ml)=1:9 比例，加入 9 倍体积的生理盐水或PBS，冰浴下匀浆后，2500g 离心 10min，取 1.4ul 上清待测;
试剂配制:
蛋白标准溶液(40mg/ml)配制:取0.4ml蒸馏水加入到0.1ml白蛋白标准储备液(200mg/ml中，充分混匀后即得，配制后应立即使用，用不完可-20℃冻存;
注:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中;
例如:待测蛋白溶解于蔗糖，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖，一般也可以用 0.9%Nacl 或 PBS 作为白蛋白标准品的稀释液。
BCP 试剂的配制:
按 10ulBCP 储备液加入 10mlBCP 空白试剂混合即可，混合后应 2~8℃避光保存，1个月有效。
白蛋白的加样:
按照下表设置空白孔、标准孔、样品孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免气泡的产生。如果样品中素浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行孔。
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体积（ul） |
空白管 |
标准孔 |
样品孔 |
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白蛋白标准配制液 （待测蛋白） |
1.4 |
- |
- |
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白蛋白标准溶液（40mg/ml） |
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1.4 |
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样本 |
- |
- |
1.4 |
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BCP试剂 |
280 |
280 |
280 |
白蛋白的测定:
顺序加入 BCP 试剂并立即混匀，室温放置(30±3)s，以空白孔调零，酶标仪 603nm处测定标准孔、样品孔吸光度(即为A标准、A样品)。
(备选步骤)当遇到脂血混浊，可设样品空白孔:取 1.4ul的待测样品，加入 280ulBCP空白试剂，以BCP 空白试剂调零，读取样本空白孔的吸光度，用样品孔吸光度减去样品空白孔吸光度后的净吸光度，计算白蛋白浓度。
结果计算:
白蛋白浓度(g/L)=(A 样品/A 标准)X白蛋白标准溶液浓度(g/L)
式中:A样品为样品孔的吸光度;
A标准为标准孔的吸光度;
参考区间:
健康成年人: 36-46g/L
白蛋白检测试剂盒，白蛋白检测试剂盒
