pGAPZC
pGAPZC
编号 | 载体名称 |
北京华越洋VECT75527 | pGAPZC |
pGAPZC载体基本信息:
启动子: | GAP |
复制子: | pUC ori |
终止子: | AOX1 TT |
质粒分类: | 酵母系列,毕赤酵母表达载体 |
质粒大小: | 2883bp |
质粒标签: | C-Myc, C-His |
原核抗性: | Zeo |
克隆菌株: | DH5α |
培养条件: | 37℃,有氧 LB |
表达宿主: | 酵母细胞 |
诱导方式: | 不需诱导 |
5'测序引物: | pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA |
3'测序引物: | AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT |
pGAPZC载体图谱:
pGAPZC载体简介:
甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母,稳定高水平表达。最近,GAPDH蛋白编码基因启动子(GAP)被深入研究,并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白,这取决于使用的碳源(Waterham等人,,1997)。GAP启动子(PGAP)的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
pGAPZ A,B,和C载体(2.9 KB)和pGAPZα,B,和C(3.1 KB)载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外,pGAPZα表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体,以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。这些载体是基于显性选择标记,Zeocin(博莱霉素)的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。
pGAPZC载体序列:
ORIGIN
1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat
61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa
121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc
181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc
241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc
301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga
361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt
421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac
481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc
541 gcggcggccg ccagcttacg tagaacaaaa actcatctca gaagaggatc tgaatagcgc
601 cgtcgaccat catcatcatc atcattgagt tttagcctta gacatgactg ttcctcagtt
661 caagttgggc acttacgaga agaccggtct tgctagattc taatcaagag gatgtcagaa
721 tgccatttgc ctgagagatg caggcttcat ttttgatact tttttatttg taacctatat
781 agtataggat tttttttgtc attttgtttc ttctcgtacg agcttgctcc tgatcagcct
841 atctcgcagc tgatgaatat cttgtggtag gggtttggga aaatcattcg agtttgatgt
901 ttttcttggt atttcccact cctcttcaga gtacagaaga ttaagtgaga ccttcgtttg
961 tgcggatccc ccacacacca tagcttcaaa atgtttctac tcctttttta ctcttccaga
1021 ttttctcgga ctccgcgcat cgccgtacca cttcaaaaca cccaagcaca gcatactaaa
1081 ttttccctct ttcttcctct agggtgtcgt taattacccg tactaaaggt ttggaaaaga
1141 aaaaagagac cgcctcgttt ctttttcttc gtcgaaaaag gcaataaaaa tttttatcac
1201 gtttcttttt cttgaaattt ttttttttag tttttttctc tttcagtgac ctccattgat
1261 atttaagtta ataaacggtc ttcaatttct caagtttcag tttcattttt cttgttctat
1321 tacaactttt tttacttctt gttcattaga aagaaagcat agcaatctaa tctaagggcg
1381 gtgttgacaa ttaatcatcg gcatagtata tcggcatagt ataatacgac aaggtgagga
1441 actaaaccat ggccaagttg accagtgccg ttccggtgct caccgcgcgc gacgtcgccg
1501 gagcggtcga gttctggacc gaccggctcg ggttctcccg ggacttcgtg gaggacgact
1561 tcgccggtgt ggtccgggac gacgtgaccc tgttcatcag cgcggtccag gaccaggtgg
1621 tgccggacaa caccctggcc tgggtgtggg tgcgcggcct ggacgagctg tacgccgagt
1681 ggtcggaggt cgtgtccacg aacttccggg acgcctccgg gccggccatg accgagatcg
1741 gcgagcagcc gtgggggcgg gagttcgccc tgcgcgaccc ggccggcaac tgcgtgcact
1801 tcgtggccga ggagcaggac tgacacgtcc gacggcggcc cacgggtccc aggcctcgga
1861 gatccgtccc ccttttcctt tgtcgatatc atgtaattag ttatgtcacg cttacattca
1921 cgccctcccc ccacatccgc tctaaccgaa aaggaaggag ttagacaacc tgaagtctag
1981 gtccctattt atttttttat agttatgtta gtattaagaa cgttatttat atttcaaatt
2041 tttctttttt ttctgtacag acgcgtgtac gcatgtaaca ttatactgaa aaccttgctt
2101 gagaaggttt tgggacgctc gaaggcttta atttgcaagc tggagaccaa catgtgagca
2161 aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg
2221 ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg
2281 acaggactat aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt
2341 ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt
2401 tctcaatgct cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc
2461 tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt
2521 gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt
2581 agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc
2641 tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa
2701 agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt
2761 tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct
2821 acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgcatgag
2881 atc
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pGAPZC载体其他相关的毕赤酵母过表达载体:
pYM39-EYFP |
pYM33-EBFP |
pYM30-ECFP |
pPICZαC |
pPICZαB |
pPICZαA |
pPICZC |
pPICZB |
pPICZA |
pGAPZαC |
pGAPZαB |
PGAPZαA |
pGAPZC |
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