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pGAPZC

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编号

载体名称

北京华越洋VECT75527

pGAPZC

 

pGAPZC载体基本信息:

启动子:

GAP

复制子:

pUC ori

终止子:

AOX1 TT

质粒分类:

酵母系列,毕赤酵母表达载体

质粒大小:

2883bp

质粒标签:

C-Myc, C-His

原核抗性:

Zeo

克隆菌株:

DH5α

培养条件:

37℃,有氧 LB

表达宿主:

酵母细胞

诱导方式:

不需诱导

5'测序引物:

pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA

3'测序引物:

AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT

 

pGAPZC载体图谱:

pGAPZC载体简介:

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母,稳定高水平表达。最近,GAPDH蛋白编码基因启动子(GAP)被深入研究,并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白,这取决于使用的碳源(Waterham等人,,1997)。GAP启动子(PGAP)的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
    pGAPZ A,B,和C载体(2.9 KB)和pGAPZα,B,和C(3.1 KB)载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外,pGAPZα表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体,以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。这些载体是基于显性选择标记,Zeocin(博莱霉素)的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。

 

pGAPZC载体序列:

ORIGIN

        1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat

       61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa

      121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc

      181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc

      241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc

      301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga

      361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt

      421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac

      481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc

      541 gcggcggccg ccagcttacg tagaacaaaa actcatctca gaagaggatc tgaatagcgc

      601 cgtcgaccat catcatcatc atcattgagt tttagcctta gacatgactg ttcctcagtt

      661 caagttgggc acttacgaga agaccggtct tgctagattc taatcaagag gatgtcagaa

      721 tgccatttgc ctgagagatg caggcttcat ttttgatact tttttatttg taacctatat

      781 agtataggat tttttttgtc attttgtttc ttctcgtacg agcttgctcc tgatcagcct

      841 atctcgcagc tgatgaatat cttgtggtag gggtttggga aaatcattcg agtttgatgt

      901 ttttcttggt atttcccact cctcttcaga gtacagaaga ttaagtgaga ccttcgtttg

      961 tgcggatccc ccacacacca tagcttcaaa atgtttctac tcctttttta ctcttccaga

     1021 ttttctcgga ctccgcgcat cgccgtacca cttcaaaaca cccaagcaca gcatactaaa

     1081 ttttccctct ttcttcctct agggtgtcgt taattacccg tactaaaggt ttggaaaaga

     1141 aaaaagagac cgcctcgttt ctttttcttc gtcgaaaaag gcaataaaaa tttttatcac

     1201 gtttcttttt cttgaaattt ttttttttag tttttttctc tttcagtgac ctccattgat

     1261 atttaagtta ataaacggtc ttcaatttct caagtttcag tttcattttt cttgttctat

     1321 tacaactttt tttacttctt gttcattaga aagaaagcat agcaatctaa tctaagggcg

     1381 gtgttgacaa ttaatcatcg gcatagtata tcggcatagt ataatacgac aaggtgagga

     1441 actaaaccat ggccaagttg accagtgccg ttccggtgct caccgcgcgc gacgtcgccg

     1501 gagcggtcga gttctggacc gaccggctcg ggttctcccg ggacttcgtg gaggacgact

     1561 tcgccggtgt ggtccgggac gacgtgaccc tgttcatcag cgcggtccag gaccaggtgg

     1621 tgccggacaa caccctggcc tgggtgtggg tgcgcggcct ggacgagctg tacgccgagt

     1681 ggtcggaggt cgtgtccacg aacttccggg acgcctccgg gccggccatg accgagatcg

     1741 gcgagcagcc gtgggggcgg gagttcgccc tgcgcgaccc ggccggcaac tgcgtgcact

     1801 tcgtggccga ggagcaggac tgacacgtcc gacggcggcc cacgggtccc aggcctcgga

     1861 gatccgtccc ccttttcctt tgtcgatatc atgtaattag ttatgtcacg cttacattca

     1921 cgccctcccc ccacatccgc tctaaccgaa aaggaaggag ttagacaacc tgaagtctag

     1981 gtccctattt atttttttat agttatgtta gtattaagaa cgttatttat atttcaaatt

     2041 tttctttttt ttctgtacag acgcgtgtac gcatgtaaca ttatactgaa aaccttgctt

     2101 gagaaggttt tgggacgctc gaaggcttta atttgcaagc tggagaccaa catgtgagca

     2161 aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg

     2221 ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg

     2281 acaggactat aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt

     2341 ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt

     2401 tctcaatgct cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc

     2461 tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt

     2521 gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt

     2581 agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc

     2641 tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa

     2701 agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt

     2761 tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct

     2821 acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgcatgag

     2881 atc

//

 

 

pGAPZC载体其他相关的毕赤酵母过表达载体:

pYM39-EYFP
pYM33-EBFP
pYM30-ECFP
pPICZαC
pPICZαB
pPICZαA
pPICZC
pPICZB
pPICZA
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PGAPZαA
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