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pGAPZA

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编号

载体名称

北京华越洋VECT75529

pGAPZA

 

pGAPZA载体基本信息:

启动子:

GAP

复制子:

pUC ori

终止子:

AOX1 TT

质粒分类:

酵母系列,毕赤酵母表达载体

质粒大小:

2884bp

质粒标签:

C-Myc, C-His

原核抗性:

Zeo

克隆菌株:

DH5α

培养条件:

37℃,有氧 LB

表达宿主:

酵母细胞

诱导方式:

无须诱导,瞬时表达

5'测序引物:

pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA

3'测序引物:

AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT

 

pGAPZA载体图谱:

pGAPZA载体简介:

 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母,稳定高水平表达。最近,GAPDH蛋白编码基因启动子(GAP)被深入研究,并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白,这取决于使用的碳源(Waterham等人,,1997)。GAP启动子(PGAP)的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
  pGAPZ A,B,和C载体(2.9 KB)和pGAPZα,B,和C(3.1 KB)载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外,pGAPZα表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体,以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。这些载体是基于显性选择标记,Zeocin(博莱霉素)的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。

 

pGAPZA载体序列:

ORIGIN

        1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat

       61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa

      121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc

      181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc

      241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc

      301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga

      361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt

      421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac

      481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc

      541 gcggcggccg ccagcttggg cccgaacaaa aactcatctc agaagaggat ctgaatagcg

      601 ccgtcgacca tcatcatcat catcattgag ttttagcctt agacatgact gttcctcagt

      661 tcaagttggg cacttacgag aagaccggtc ttgctagatt ctaatcaaga ggatgtcaga

      721 atgccatttg cctgagagat gcaggcttca tttttgatac ttttttattt gtaacctata

      781 tagtatagga ttttttttgt cattttgttt cttctcgtac gagcttgctc ctgatcagcc

      841 tatctcgcag ctgatgaata tcttgtggta ggggtttggg aaaatcattc gagtttgatg

      901 tttttcttgg tatttcccac tcctcttcag agtacagaag attaagtgag accttcgttt

      961 gtgcggatcc cccacacacc atagcttcaa aatgtttcta ctcctttttt actcttccag

     1021 attttctcgg actccgcgca tcgccgtacc acttcaaaac acccaagcac agcatactaa

     1081 attttccctc tttcttcctc tagggtgtcg ttaattaccc gtactaaagg tttggaaaag

     1141 aaaaaagaga ccgcctcgtt tctttttctt cgtcgaaaaa ggcaataaaa atttttatca

     1201 cgtttctttt tcttgaaatt ttttttttta gtttttttct ctttcagtga cctccattga

     1261 tatttaagtt aataaacggt cttcaatttc tcaagtttca gtttcatttt tcttgttcta

     1321 ttacaacttt ttttacttct tgttcattag aaagaaagca tagcaatcta atctaagggc

     1381 ggtgttgaca attaatcatc ggcatagtat atcggcatag tataatacga caaggtgagg

     1441 aactaaacca tggccaagtt gaccagtgcc gttccggtgc tcaccgcgcg cgacgtcgcc

     1501 ggagcggtcg agttctggac cgaccggctc gggttctccc gggacttcgt ggaggacgac

     1561 ttcgccggtg tggtccggga cgacgtgacc ctgttcatca gcgcggtcca ggaccaggtg

     1621 gtgccggaca acaccctggc ctgggtgtgg gtgcgcggcc tggacgagct gtacgccgag

     1681 tggtcggagg tcgtgtccac gaacttccgg gacgcctccg ggccggccat gaccgagatc

     1741 ggcgagcagc cgtgggggcg ggagttcgcc ctgcgcgacc cggccggcaa ctgcgtgcac

     1801 ttcgtggccg aggagcagga ctgacacgtc cgacggcggc ccacgggtcc caggcctcgg

     1861 agatccgtcc cccttttcct ttgtcgatat catgtaatta gttatgtcac gcttacattc

     1921 acgccctccc cccacatccg ctctaaccga aaaggaagga gttagacaac ctgaagtcta

     1981 ggtccctatt tattttttta tagttatgtt agtattaaga acgttattta tatttcaaat

     2041 ttttcttttt tttctgtaca gacgcgtgta cgcatgtaac attatactga aaaccttgct

     2101 tgagaaggtt ttgggacgct cgaaggcttt aatttgcaag ctggagacca acatgtgagc

     2161 aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag

     2221 gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc

     2281 gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt

     2341 tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct

     2401 ttctcaatgc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg

     2461 ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct

     2521 tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat

     2581 tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg

     2641 ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa

     2701 aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt

     2761 ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc

     2821 tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgcatga

     2881 gatc

//

 

 

pGAPZA载体其他相关的毕赤酵母过表达载体:

pYM39-EYFP
pYM33-EBFP
pYM30-ECFP
pPICZαC
pPICZαB
pPICZαA
pPICZC
pPICZB
pPICZA
pGAPZαC
pGAPZαB
PGAPZαA
pGAPZC
pGAPZB
pGAPZA