BJ5183-AD-1化学感受态细胞

ꄴ上一个： BL21(DE3)pLysS感受态细胞

ꄲ下一个： AGL1 电击/电转感受态细胞

BJ5183-AD-1化学感受态细胞

BJ5183-AD-1 Chemically Competent Cell

编号	名称	规格
北京华越洋GX890	BJ5183-AD-1化学感受态细胞	10×100ul

BJ5183-AD-1感受态细胞基因型：

endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (Strr) [pAdEasy-1 (Ampr)]

BJ5183-AD-1感受态细胞说明：

BJ5183-AD-1是携带了腺病毒质粒pAdeasy-1的BJ5183菌株。BJ5183菌株是一种具有较高重组活力的大肠杆菌菌株，是目前腺病毒系统最常用的感受态细胞。BJ5183菌株含有sbcBC recBC双重突变，赋予BJ5183细胞较强的重组能力，有利于转入的目的基因与腺病毒骨架质粒的重组。endA1（缺失核酸内切酶）的突变有利于重组DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。BJ5183-AD-1菌株细胞中已经提前转入了腺病毒质粒pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)]，赋予该菌株氨苄抗性，在病毒质粒构建时，只需转入线性化的目的质粒即可，简化了实验步骤，提高了病毒质粒重组概率。Strr 赋予BJ5183-AD-1菌株链霉素抗性。BJ5183-AD-1感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301质粒(1163bp)检测转化效率>1×10⁵ cfu/μg DNA。

BJ5183-AD-1感受态细胞操作方法：

1. 将BJ5183-AD-1感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的质粒（含有目标基因并线性化），并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

BJ5183-AD-1感受态细胞注意事项：

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

2. 混入目的DNA时应轻柔操作。

3. BJ5183-AD-1菌株的质粒产量不高。腺病毒构建成功后，可选择在其他大肠杆菌菌株中扩繁，纯化质粒。

4. BJ5183-AD-1感受态细胞对温度敏感，应储存在-80℃超低温冰箱，避免温度波动，温度波动会降低感受态转化效率。

BJ5183-AD-1感受态细胞保存条件： -80℃

华越洋BJ5183-AD-1感受态细胞相关：

OverExpress C43(DE3)化学表达感受态细胞	DH10B 电击/电转感受态细胞	F-TOP10快速转化感受态细胞
TG1电击/电转感受态细胞	BL21 感受态细胞	F-DH5α快速转化感受态细胞
Stable化学感受态细胞	BL21(DE3)pLysS感受态细胞	EPI400电击/电转感受态细胞
Stable 电击/电转感受态细胞	BJ5183-AD-1化学感受态细胞	EHA105电击/电转感受态细胞
LBA4404电击/电转感受态细胞	AGL1 电击/电转感受态细胞	DH10bac(BmNPV)克隆感受态细胞
GV3101电击/电转感受态细胞	DMT感受态细胞	DH5α超级感受态细胞
Rosetta-gami B(DE3)pLacI感受态细胞	TKB1感受态细胞	DH5α- T1感受态细胞
Rosetta-gami2(DE3)pLacI感受态细胞	Origami感受态细胞	BLR(DE3)感受态细胞
Rosetta-gami感受态细胞	HMS174, HMS174(DE3), HMS174(DE3)pLysS	BLR(DE3)pLysS感受态细胞
Rosetta感受态细胞	平板涂布专用玻璃珠	BLR(DE3)pLysS感受态细胞
Rosetta-gami 2(DE3)pLysS感受态细胞	Stbl3感受态细胞	BL21-SI感受态细胞
Stbl3超级感受态细胞	NMY51酵母感受态细胞	BL21-Gold(DE3)感受态细胞
RosettaBlue感受态细胞	TG1感受态细胞，TG1感受态细胞	BL21-AI感受态细胞
RosettaBlue(DE3)感受态细胞	EHA105感受态细胞	BL21(DE3)pLacI感受态细胞
TOP10F′ 超级感受态细胞	Stbl2感受态细胞	BL21 trxB(DE3)感受态细胞
RosettaBlue(DE3)pLysS感受态细胞	DH10B感受态细胞	BL21 trxB(DE3)pLysS感受态细胞
RosettaBlue(DE3)pLacI感受态细胞	T1感受态细胞	BL21 Star(DE3)感受态细胞
Tuner(DE3)pLacI感受态细胞	M15感受态细胞	BL21 Star(DE3)pLySs感受态细胞
Rosetta2(DE3)感受态细胞	HB101感受态细胞，HB101 Competent Cell	AD494(DE3)感受态细胞
Rosetta2(DE3)pLacI感受态细胞	JM109感受态细胞	KM71H,KM71H酵母感受态细胞
Tuner(DE3)pLysS感受态细胞	Y1HGold酵母感受态细胞	EHA101,EHA101农杆菌感受态细胞
Rosetta(DE3)感受态细胞	Rosseta(DE3)感受态细胞	ER2566感受态细胞
Rosetta(DE3)pLySs感受态细胞	AH109酵母感受态细胞	Tuner(DE3)，Tuner(DE3)感受态细胞
Rosetta(DE3)pLacI感受态细胞	TB1感受态细胞，TB1	TOP10F` 感受态细胞
Rosetta 2感受态细胞	EGY48酵母菌感受态细胞	EHA101农杆菌感受态细胞
Rosetta 2(DE3)pLySs感受态细胞	XL1-Blue感受态细胞	TG1感受态细胞
Origami B感受态细胞	DH10Bac感受态细胞	XL10-Gold 感受态细胞
Origami 2(DE3)pLysS感受态细胞	BJ5183感受态细胞，BJ5183	农杆菌感受态细胞
Tuner(DE3)感受态细胞	DB3.1感受态细胞	大肠杆菌感受态细胞
Origami 2(DE3)pLacI感受态细胞	JM110感受态细胞	C43, C43(DE3)感受态细胞
Tuner感受态细胞	GV3101感受态细胞	Mach1-T1 Phage Resistant 感受态细胞
OmniMAX2-T1感受态细胞	SURE感受态细胞，SURE感受态细胞	OrigamiB,OrigamiB(DE3),OrigamiB(DE3)pLysS,OrigamiB(DE3)pLacI
NovaF-感受态细胞	BL21(DE3)感受态细胞	C41(DE3), C41(DE3)PlysS感受态细胞
NovaBlue感受态细胞	stbl3感受态细胞，stbl3感受态细胞	XL1-Blue化学感受态细胞