p3XFLAG-CMV-14
p3XFLAG-CMV-14
编号 | 载体名称 |
北京华越洋生物VECT6080 | p3XFLAG-CMV-14 |
p3xFLAG CMV14载体基本信息
载体名称: | p3xFLAG-CMV-14, p3xFLAG CMV14 |
质粒类型: | 哺乳动物细胞表达载体 |
启动子: | CMV |
拷贝数: | 低拷贝 |
克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
载体大小: | 6310 bp |
5' 测序引物: | CMV-F: 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3' |
3' 测序引物: | hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA |
载体标签: | 3XFLAG (C-端) ，含EK蛋白酶识别位点 |
载体抗性: | 氨苄青霉素 |
筛选标记: | Neomycin |
克隆菌株: | -- |
宿主细胞（系）: | 常用细胞系，如293、Hela等 |
备注: | CMV启动子驱动目的蛋白高水平表达；FLAG标签含8个氨基酸残基（DYKDDDDK），3XFLAG标签含22个氨基酸残基；一般位于融合蛋白的外表面，具有高度免疫灵敏性，便于检测和纯化目的蛋白；用EK蛋白酶可将3XFLAG标签切除。 |
稳定性: | 瞬表达 |
组成型: | 组成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
p3xFLAG CMV14载体质粒图谱和多克隆位点信息
p3xFLAG CMV14载体简介
p3xFlag-CMV-14表达载体是一个6.3 kb的载体，从pCMV5载体衍生而来，用于在哺乳动物细胞内瞬表达或稳表达C末端带有3xFlag标签的融合蛋白。载体多克隆位点下游片段编码了三个相邻Flag抗原表位（Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp）。这使得能够使用Flag M2抗体检测蛋白表达情况。
载体上的人类巨细胞病毒(cytomegalovirus)启动子调控区域促进了Flag融合蛋白基因的转录.氨基糖苷类磷酸转移酶基因(Neo)使得载体具有耐氨基糖苷类例如为G418的能力,允许筛选转染成功的细胞株。
P3XFLAG-CMV-14表达载体是大肠杆菌和哺乳动物细胞的穿梭载体。当使用SV40 T抗原表达的宿主细胞系，如COS细胞，复制和基因组整合效率能够达到最佳最佳状态。
p3xFLAG CMV14载体序列
ORIGIN
1 CCATTCGCCA TTCAGGCTGC GCAACTGTTG GGAAGGGCGA TCGGTGCGGG CCTCTTCGCT
61 ATTACGCCAG CTGGCGAAAG GGGGATGTGC TGCAAGGCGA TTAAGTTGGG TAACGCCAGG
121 GTTTTCCCAG TCACGACGTT GTAAAACGAC GGCCAGTGCC AAGCTGATCT ATACATTGAA
181 TCAATATTGG CAATTAGCCA TATTAGTCAT TGGTTATATA GCATAAATCA ATATTGGCTA
241 TTGGCCATTG CATACGTTGT ATCTATATCA TAATATGTAC ATTTATATTG GCTCATGTCC
301 AATATGACCG CCATGTTGAC ATTGATTATT GACTAGTTAT TAATAGTAAT CAATTACGGG
361 GTCATTAGTT CATAGCCCAT ATATGGAGTT CCGCGTTACA TAACTTACGG TAAATGGCCC
421 GCCTGGCTGA CCGCCCAACG ACCCCCGCCC ATTGACGTCA ATAATGACGT ATGTTCCCAT
481 AGTAACGCCA ATAGGGACTT TCCATTGACG TCAATGGGTG GAGTATTTAC GGTAAACTGC
541 CCACTTGGCA GTACATCAAG TGTATCATAT GCCAAGTCCG CCCCCTATTG ACGTCAATGA
601 CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTACGGGACT TTCCTACTTG
661 GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT GGCAGTACAC
721 CAATGGGCGT GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA AGTCTCCACC CCATTGACGT
781 CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC GTAATAACCC
841 CGCCCCGTTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG GAGGTCTATA TAAGCAGAGC
901 TCGTTTAGTG AACCGTCAGA ATTAAGCTTG CGGCCGCGAA TTCATCGATA GATCTGATAT
961 CGGTACCAGT CGACTCTAGA GGATCCCGGG CTGACTACAA AGACCATGAC GGTGATTATA
1021 AAGATCATGA CATCGACTAC AAGGATGACG ATGACAAGTA GTGATCCCGG GTGGCATCCC
1081 TGTGACCCCT CCCCAGTGCC TCTCCTGGCC CTGGAAGTTG CCACTCCAGT GCCCACCAGC
1141 CTTGTCCTAA TAAAATTAAG TTGCATCATT TTGTCTGACT AGGTGTCCTT CTATAATATT
1201 ATGGGGTGGA GGGGGGTGGT ATGGAGCAAG GGGCAAGTTG GGAAGACAAC CTGTAGGGCC
1261 TGCGGGGTCT ATTGGGAACC AAGCTGGAGT GCAGTGGCAC AATCTTGGCT CACTGCAATC
1321 TCCGCCTCCT GGGTTCAAGC GATTCTCCTG CCTCAGCCTC CCGAGTTGTT GGGATTCCAG
1381 GCATGCATGA CCAGGCTCAG CTAATTTTTG TTTTTTTGGT AGAGACGGGG TTTCACCATA
1441 TTGGCCAGGC TGGTCTCCAA CTCCTAATCT CAGGTGATCT ACCCACCTTG GCCTCCCAAA
1501 TTGCTGGGAT TACAGGCGTG AACCACTGCT CCCTTCCCTG TCCTTCTGAT TTTAAAATAA
1561 CTATACCAGC AGGAGGACGT CCAGACACAG CATAGGCTAC CTGGCCATGC CCAACCGGTG
1621 GGACATTTGA GTTGCTTGCT TGGCACTGTC CTCTCATGCG TTGGGTCCAC TCAGTAGATG
1681 CCTGTTGAAT TGGGTACGCG GCCAGCTTGG CTGTGGAATG TGTGTCAGTT AGGGTGTGGA
1741 AAGTCCCCAG GCTCCCCAGC AGGCAGAAGT ATGCAAAGCA TGCATCTCAA TTAGTCAGCA
1801 ACCAGGTGTG GAAAGTCCCC AGGCTCCCCA GCAGGCAGAA GTATGCAAAG CATGCATCTC
1861 AATTAGTCAG CAACCATAGT CCCGCCCCTA ACTCCGCCCA TCCCGCCCCT AACTCCGCCC
1921 AGTTCCGCCC ATTCTCCGCC CCATGGCTGA CTAATTTTTT TTATTTATGC AGAGGCCGAG
1981 GCCGCCTCGG CCTCTGAGCT ATTCCAGAAG TAGTGAGGAG GCTTTTTTGG AGGAATTGAT
2041 CAGCTTGGGA TCTGATCAAG AGACAGGATG AGGATCGTTT CGCATGATTG AACAAGATGG
2101 ATTGCACGCA GGTTCTCCGG CCGCTTGGGT GGAGAGGCTA TTCGGCTATG ACTGGGCACA
2161 ACAGACAATC GGCTGCTCTG ATGCCGCCGT GTTCCGGCTG TCAGCGCAGG GGCGCCCGGT
2221 TCTTTTTGTC AAGACCGACC TGTCCGGTGC CCTGAATGAA CTGCAGGACG AGGCAGCGCG
2281 GCTATCGTGG CTGGCCACGA CGGGCGTTCC TTGCGCAGCT GTGCTCGACG TTGTCACTGA
2341 AGCGGGAAGG GACTGGCTGC TATTGGGCGA AGTGCCGGGG CAGGATCTCC TGTCATCTCA
2401 CCTTGCTCCT GCCGAGAAAG TATCCATCAT GGCTGATGCA ATGCGGCGGC TGCATACGCT
2461 TGATCCGGCT ACCTGCCCAT TCGACCACCA AGCGAAACAT CGCATCGAGC GAGCACGTAC
2521 TCGGATGGAA GCCGGTCTTG TCGATCAGGA TGATCTGGAC GAAGAGCATC AGGGGCTCGC
2581 GCCAGCCGAA CTGTTCGCCA GGCTCAAGGC GCGCATGCCC GACGGCGAGG ATCTCGTCGT
2641 GACCCATGGC GATGCCTGCT TGCCGAATAT CATGGTGGAA AATGGCCGCT TTTCTGGATT
2701 CATCGACTGT GGCCGGCTGG GTGTGGCGGA CCGCTATCAG GACATAGCGT TGGCTACCCG
2761 TGATATTGCT GAAGAGCTTG GCGGCGAATG GGCTGACCGC TTCCTCGTGC TTTACGGTAT
2821 CGCCGCTCCC GATTCGCAGC GCATCGCCTT CTATCGCCTT CTTGACGAGT TCTTCTGAGC
2881 GGGACTCTGG GGTTCGAAAT GACCGACCAA GCGACGCCCA ACCTGCCATC ACGAGATTTC
2941 GATTCCACCG CCGCCTTCTA TGAAAGGTTG GGCTTCGGAA TCGTTTTCCG GGACGCCGGC
3001 TGGATGATCC TCCAGCGCGG GGATCTCATG CTGGAGTTCT TCGCCCACCC CGGGCTCGAT
3061 CCCCTCGCGA GTTGGTTCAG CTGCTGCCTG AGGCTGGACG ACCTCGCGGA GTTCTACCGG
3121 CAGTGCAAAT CCGTCGGCAT CCAGGAAACC AGCAGCGGCT ATCCGCGCAT CCATGCCCCC
3181 GAACTGCAGG AGTGGGGAGG CACGATGGCC GCTTTGGTCG ACCCGGACGG GACGCTCCTG
3241 CGCCTGATAC AGAACGAATT GCTTGCAGGC ATCTCATGAG TGTGTCTTCC CGTTTTCCGC
3301 CTGAGGTCAC TGCGTGGATG GAGCGCTGGC GCCTGCTGCG CGACGGCGAG CTGCTCACCA
3361 CCCACTCGCC AAGCTGGAAC CGTAAAAAGG CCGCGTTGCT GGCGTTTTTC CATAGGCTCC
3421 GCCGATCATA ATCAGCCATA CCACATTTGT AGAGGTTTTA CTTGCTTTAA AAAACCTCCC
3481 ACACCTCCCC CTGAACCTGA AACATAAAAT GAATGCAATT GTTGTTGTTA ACTTGTTTAT
3541 TGCAGCTTAT AATGGTTACA AATAAAGCAA TAGCATCACA AATTTCACAA ATAAAGCATT
3601 TTTTTCACTG CATTCTAGTT GTGGTTTGTC CAAACTCATC AATGTATCTT ATCATGTCTG
3661 GATCAATTCC CTATAGTGAG TCGTATTAAA TTCGTAATCA TGTCATAGCT GTTTCCTGTG
3721 TGAAATTGTT ATCCGCTCAC AATTCCACAC AACATACGAG CCGGAAGCAT AAAGTGTAAA
3781 GCCTGGGGTG CCTAATGAGT GAGCTAACTC ACATTAATTG CGTTGCGCTC ACTGCCCGCT
3841 TTCCAGTCGG GAAACCTGTC GTGCCAGCTG CATTAATGAA TCGGCCAACG CGCGGGGAGA
3901 GGCGGTTTGC GTATTGGGCG CTCTTCCGCT TCCTCGCTCA CTGACTCGCT GCGCTCGGTC
3961 GTTCGGCTGC GGCGAGCGGT ATCAGCTCAC TCAAAGGCGG TAATACGGTT ATCCACAGAA
4021 TCAGGGGATA ACGCAGGAAA GAACATGTGA GCAAAAGGCC AGCAAAAGGC CAGGAACCGT
4081 AAAAAGGCCG CGTTGCTGGC GTTTTTCCAT AGGCTCCGCC CCCCTGACGA GCATCACAAA
4141 AATCGACGCT CAAGTCAGAG GTGGCGAAAC CCGACAGGAC TATAAAGATA CCAGGCGTTT
4201 CCCCCTGGAA GCTCCCTCGT GCGCTCTCCT GTTCCGACCC TGCCGCTTAC CGGATACCTG
4261 TCCGCCTTTC TCCCTTCGGG AAGCGTGGCG CTTTCTCATA GCTCACGCTG TAGGTATCTC
4321 AGTTCGGTGT AGGTCGTTCG CTCCAAGCTG GGCTGTGTGC ACGAACCCCC CGTTCAGCCC
4381 GACCGCTGCG CCTTATCCGG TAACTATCGT CTTGAGTCCA ACCCGGTAAG ACACGACTTA
4441 TCGCCACTGG CAGCAGCCAC TGGTAACAGG ATTAGCAGAG CGAGGTATGT AGGCGGTGCT
4501 ACAGAGTTCT TGAAGTGGTG GCCTAACTAC GGCTACACTA GAAGAACAGT ATTTGGTATC
4561 TGCGCTCTGC TGAAGCCAGT TACCTTCGGA AAAAGAGTTG GTAGCTCTTG ATCCGGCAAA
4621 CAAACCACCG CTGGTAGCGG TGGTTTTTTT GTTTGCAAGC AGCAGATTAC GCGCAGAAAA
4681 AAAGGATCTC AAGAAGATCC TTTGATCTTT TCTACGGGGT CTGACGCTCA GTGGAACGAA
4741 AACTCACGTT AAGGGATTTT GGTCATGAGA TTATCAAAAA GGATCTTCAC CTAGATCCTT
4801 TTAAATTAAA AATGAAGTTT TAAATCAATC TAAAGTATAT ATGAGTAAAC TTGGTCTGAC
4861 AGTTACCAAT GCTTAATCAG TGAGGCACCT ATCTCAGCGA TCTGTCTATT TCGTTCATCC
4921 ATAGTTGCCT GACTCCCCGT CGTGTAGATA ACTACGATAC GGGAGGGCTT ACCATCTGGC
4981 CCCAGTGCTG CAATGATACC GCGAGACCCA CGCTCACCGG CTCCAGATTT ATCAGCAATA
5041 AACCAGCCAG CCGGAAGGGC CGAGCGCAGA AGTGGTCCTG CAACTTTATC CGCCTCCATC
5101 CAGTCTATTA ATTGTTGCCG GGAAGCTAGA GTAAGTAGTT CGCCAGTTAA TAGTTTGCGC
5161 AACGTTGTTG CCATTGCTAC AGGCATCGTG GTGTCACGCT CGTCGTTTGG TATGGCTTCA
5221 TTCAGCTCCG GTTCCCAACG ATCAAGGCGA GTTACATGAT CCCCCATGTT GTGCAAAAAA
5281 GCGGTTAGCT CCTTCGGTCC TCCGATCGTT GTCAGAAGTA AGTTGGCCGC AGTGTTATCA
5341 CTCATGGTTA TGGCAGCACT GCATAATTCT CTTACTGTCA TGCCATCCGT AAGATGCTTT
5401 TCTGTGACTG GTGAGTACTC AACCAAGTCA TTCTGAGAAT AGTGTATGCG GCGACCGAGT
5461 TGCTCTTGCC CGGCGTCAAT ACGGGATAAT ACCGCGCCAC ATAGCAGAAC TTTAAAAGTG
5521 CTCATCATTG GAAAACGTTC TTCGGGGCGA AAACTCTCAA GGATCTTACC GCTGTTGAGA
5581 TCCAGTTCGA TGTAACCCAC TCGTGCACCC AACTGATCTT CAGCATCTTT TACTTTCACC
5641 AGCGTTTCTG GGTGAGCAAA AACAGGAAGG CAAAATGCCG CAAAAAAGGG AATAAGGGCG
5701 ACACGGAAAT GTTGAATACT CATACTCTTC CTTTTTCAAT ATTATTGAAG CATTTATCAG
5761 GGTTATTGTC TCATGAGCGG ATACATATTT GAATGTATTT AGAAAAATAA ACAAATAGGG
5821 GTTCCGCGCA CATTTCCCCG AAAAGTGCCA CCTGACGCGC CCTGTAGCGG CGCATTAAGC
5881 GCGGCGGGTG TGGTGGTTAC GCGCAGCGTG ACCGCTACAC TTGCCAGCGC CCTAGCGCCC
5941 GCTCCTTTCG CTTTCTTCCC TTCCTTTCTC GCCACGTTCG CCGGCTTTCC CCGTCAAGCT
6001 CTAAATCGGG GGCTCCCTTT AGGGTTCCGA TTTAGTGCTT TACGGCACCT CGACCCCAAA
6061 AAACTTGATT AGGGTGATGG TTCACGTAGT GGGCCATCGC CCTGATAGAC GGTTTTTCGC
6121 CCTTTGACGT TGGAGTCCAC GTTCTTTAAT AGTGGACTCT TGTTCCAAAC TGGAACAACA
6181 CTCAACCCTA TCTCGGTCTA TTCTTTTGAT TTATAAGGGA TTTTGCCGAT TTCGGCCTAT
6241 TGGTTAAAAA ATGAGCTGAT TTAACAAAAA TTTAACGCGA ATTTTAACAA AATATTAACG
6301 CTTACAATTT
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其他哺乳动物表达载体：
