pPICZα A
pPICZα A
pPICZα A
编号 | 载体名称 |
北京华越洋生物VECT2580 | pPICZα A |
pPICZα A载体基本信息
载体名称: | pPICZα A |
---|---|
质粒类型: | 毕赤酵母蛋白表达载体 |
表达水平: | 高拷贝 |
启动子: | AOX1 |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体大小: | 3593 bp |
5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´ |
3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
载体标签: | C-Myc, C-His |
载体抗性: | Zeocin 博来霉素 |
筛选标记: | HIS4 |
备注: | 该载体本身含有signal alpha 分泌信号肽,该信号肽本身含有ATG启动子,所以插入基因可以不包含起始密码子ATG。 |
稳定性: | 稳定 Stable |
组成型: | 组成型 Constitutive |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pPICZα A载体质粒图谱和多克隆位点信息
pPICZaA载体简介
pPICZα A,B和C是3.6 kb的毕赤酵母蛋白分泌表达载体。表达的重组蛋白是融合蛋白,含有一个N-端多肽,编码酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)α-因子分泌信号。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白,并且可以用在任何毕赤酵母中,包括X33,GS115菌株,SMD1168H,KM71H。pPICZα A,B和C系列载体包含以下元素:
•5'端含有AOX1启动子的严格调控,利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因(Ellis等,1985; Koutz等人,1989;tschopp等人,1987A)。
•α-因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。
•Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选(Baron等人,1992; Drocourt等人,1990)。
•C-端含Myc和His标签,可以用于检测和纯化重组蛋白。
•pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。
pPICZaA载体序列
LOCUS pPICZα\A 3593 bp DNA circular SYN 2-SEP-2003 SOURCE ORGANISM COMMENT This file is created by Vector NTI FEATURES Location/Qualifiers source 1..3593 /invitrogen="25" /vntifkey="98" primer complement(1423..1443) /invitrogen="1880000" /vntifkey="27" /label=3'\AOX1\primer primer 855..875 /invitrogen="1890000" /vntifkey="27" /label=5'\AOX1\primer CDS 1320..1337 /invitrogen="1010000" /vntifkey="4" /label=6xHis primer 1144..1164 /invitrogen="1900000" /vntifkey="27" /label=alpha-factor\primer terminator 1341..1682 /invitrogen="2550000" /vntifkey="43" /label=AOX1\transcription\terminator CDS 1275..1304 /invitrogen="1090000" /vntifkey="4" /label=c-myc\epitope terminator 2538..2855 /invitrogen="2560000" /vntifkey="43" /label=CYC1\transcription\terminator promoter 2095..2162 /invitrogen="2340000" /vntifkey="30" /label=EM7\promoter misc_feature 1208..1274 /invitrogen="1460000" /vntifkey="21" /label=MCS rep_origin complement(2866..3539) /invitrogen="2540000" /vntifkey="33" /label=pUC\origin 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cccgggactt cgtggaggac gacttcgccg 2281 gtgtggtccg ggacgacgtg accctgttca tcagcgcggt ccaggaccag gtggtgccgg 2341 acaacaccct ggcctgggtg tgggtgcgcg gcctggacga gctgtacgcc gagtggtcgg 2401 aggtcgtgtc cacgaacttc cgggacgcct ccgggccggc catgaccgag atcggcgagc 2461 agccgtgggg gcgggagttc gccctgcgcg acccggccgg caactgcgtg cacttcgtgg 2521 ccgaggagca ggactgacac gtccgacggc ggcccacggg tcccaggcct cggagatccg 2581 tccccctttt cctttgtcga tatcatgtaa ttagttatgt cacgcttaca ttcacgccct 2641 ccccccacat ccgctctaac cgaaaaggaa ggagttagac aacctgaagt ctaggtccct 2701 atttattttt ttatagttat gttagtatta agaacgttat ttatatttca aatttttctt 2761 ttttttctgt acagacgcgt gtacgcatgt aacattatac tgaaaacctt gcttgagaag 2821 gttttgggac gctcgaaggc tttaatttgc aagctggaga ccaacatgtg agcaaaaggc 2881 cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc 2941 ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga 3001 ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc 3061 ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcaa 3121 tgctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg 3181 cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc 3241 aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga 3301 gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact 3361 agaaggacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt 3421 ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag 3481 cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg 3541 tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag atc //