植物蔗糖含量检测试剂盒
植物蔗糖含量检测试剂盒
可见分光光度法
规格:hyysb98-50R,50T/48S 680元
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系华越洋工作人员。
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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提取液 |
液体100mL×1瓶 |
4℃保存 |
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试剂一 |
粉剂10mg×1支 |
4℃保存 |
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试剂二 |
液体2.5mL×1瓶 |
4℃保存 |
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试剂三 |
液体40mL×1瓶 |
4℃保存 |
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试剂四 |
液体10mL×1瓶 |
4℃保存 |
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试剂五 |
粉剂0.5g×1瓶 |
常温保存 |
溶液的配制:
试剂一：临用前加1mL蒸馏水溶解，用水稀释10倍，备用，即1mg/mL。
产品说明:
蔗糖是植物光合作用的主要产物，也是糖分运输和储藏的主要形式。因此，测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外，蔗糖含量是饮料、蜂蜜、果脯、糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。先用碱与样本共热，破坏其中的还原糖。然后在酸性条件下将蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖进一步与间苯二酚反应，生成有色物质，在480nm下有特征吸收峰。
技术指标:
最低检出限:0.0148mg/mL
线性范围:0.0195-6mg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、ImL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:
- 样本处理(可适当调整待测样本量)
称取0.1-0.2g样本，常温研碎，加入1mL提取液，适当研磨后快速转移到离心管中，置于80℃水浴锅中10min(缠封口膜，防止爆盖)，振荡3~5次，冷却后，4000g，25℃离心10min，取上清，加入2mg试剂五,80℃脱色30min(缠封口膜，防止爆盖)，再加入1mL提取液，4000g，25℃离心10min,取上清液测定。
二、测定步骤
1、可见分光光度计预热30min以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。
2、样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂)：
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试剂(uL) |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
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样本 |
- |
- |
100 |
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试剂一 |
- |
100 |
- |
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蒸馏水 |
100 |
- |
- |
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试剂二 |
50 |
50 |
50 |
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混匀，沸水浴煮沸5min左右(缠封口膜，防止爆盖) |
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试剂三 |
700 |
700 |
700 |
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试剂四 |
200 |
200 |
200 |
混匀，沸水浴10min(缠封口膜，防止爆盖)，冷却后测定480nm处吸光值，空白管、标准管和测定管分别记为A1、A2和A3。
三、蔗糖含量计算:
1、按照样本蛋白浓度计算
蔗糖含量(mg/mg prot)=(C标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)(V1×Cpr)=(A3-AI)÷(A2-A1)÷Cpr
此法需要自行测定蛋白浓度。
- 按照样本质量计算
蔗糖含量(mg/g质量)=(C标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
C标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.lmL;V2:加入提取液体积,2mL;Cpr:样本蛋白质浓度，mg/mL;W:样本质量，g。
注意事项:
当样本吸光值大于1.1时，建议将样本用提取液稀释后进行测定。
