K599(pSoup-p19)感受态细胞

K599(pSoup-p19)感受态细胞

K599(pSoup-p19) Chemically Competent Cell

基因型

Agrobacterium rhizogenes (strR) pRi2659 (agropine type)(pSoup-p19-tetR)

K599(pSoup-p19)感受态细胞

产品说明

P19蛋白来源于番茄丛矮病毒，可抑制宿主对外源基因的RNA沉默效应，提高异源基因转录本的稳定性，进而促进异源蛋白的表达，广泛应用于转基因植物及烟草叶片，拟南芥叶片，番茄叶片或原生质体的瞬时表达系统中。发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599发根农杆菌（NCPPB2659）含有pRi2659农杆碱型Ri质粒，具有广泛的宿主范围（葫芦科，豆科，茄科等），同时具有链霉素抗性。在K599菌株中转入help质粒：pSoup-p19即为K599((pSoup-p19)菌株，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制，同时赋予该菌株四环素（tet）抗性。本公司生产的K599((pSoup-p19)化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pGs2质粒（4445bp，KanR）检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

K599(pSoup-p19)感受态细胞

常规操作方法

1.取-80℃保存的K599((pSoup-p19)发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。

2.  每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA（转化效率较高，第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量），用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀，依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。

3. 冰浴中拿出放室温，加入700μl 无抗生素的TY液体培养基，于28℃振荡培养2小时。

4. 6000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3 天

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