EBY.VW4000 感受态细胞
hyypb84-1ml
EBY.VW4000 感受态细胞产品规格
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EBY.VW4000： |
100μl×10 支 |
保存：-80℃（12 个月） |
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Carrier DNA ( 10 μg/μl) |
50μl |
保存：-20℃（12 个月） |
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PEG/LiAC： |
5ml |
保存： RT（12 个月） |
EBY.VW4000 感受态细胞产品说明
EBY.VW4000 是德国法兰克福大学 Boles 教授敲除酿酒酵母内 源 18 个己糖转运蛋白全敲除的菌株， 主要通过酵母互补实验用于 检测蛋白糖转运功能。
其基因为： leu2-3，112 ura3-52 trp1-289 his3Δ1 MAL2-8C SUC2 hxt17Δ hxt13Δ hxt15Δ hxt16Δ hxt14Δ hxt12Δ hxt9Δ hxt11Δ hxt10Δ hxt8Δ hxt514Δ hxt2Δ hxt367Δ gal2Δ slt1Δ agt1Δ ydl247Δ yjr160cΔ
EBY.VW4000 感受态细胞
操作方法
1. 取一支无菌的 1.5ml EP 管，依次加入预冷的目的质粒 1-3µg ， Carrier DNA 5µl ，100µl 冰上融化的 EBY.VW4000 感受态细胞， PEG/LiAc 500µl ，轻轻翻转混匀 6-8 次；
2. 30℃水浴 30min，每 15min 轻轻翻转混匀 6-8 次；
3. 42℃水浴 15min，每 7.5min 轻轻翻转混匀 6-8 次；
4. 12000rpm 瞬时离心弃上清，用 100µl 0.9% NaCl 或 ddH2O 重悬， 涂板，30℃培养 48-96h。
EBY.VW4000 感受态细胞注意事项
1. 使用 Carrier DNA 前，请把装有 Carrier DNA 的管子在沸水中煮 沸 5min，然后立即放在冰上，用后放在-20℃储存备用。
2. PEG 溶液在低温环境下会析出，请于常温下完全溶解后使用。
3. 转化全程要无菌操作。
4. 12000rpm 瞬时离心指离心速度升到 12000rpm 时立即停止离心。
