SUSY7/ura3感受态细胞  酵母突变体

SUSY7/ura3感受态细胞  酵母突变体

产品规格（huayueyang0831）

SUSY7/ura3：            100μl×10 支      保存：-80℃（12 个月）

Carrier DNA (10 μg/μl)     50μl           保存：-20℃（12 个月）

PEG/LiAC：                 5ml 保存：      RT（12 个月）

SUSY7/ura3感受态细胞  酵母突变体产品说明

酵母突变体(SUSY7/ura3)，此种突变体不能分泌转化酶，但可表达一个源于植物编码的胞质蔗糖合成酶(sucrosesynthase)的基因，致使酵母可以在胞内代谢蔗糖。这一突变体菌株与在酵母表达载体上构建的 cDNA 文库一起转化，转化体根据它们在以蔗糖为唯一碳源的培养基上的生长能力而被筛选出来。这样通过功能互补从文库中克隆出未知蔗糖运输蛋白基因。

SUSY7/ura3感受态细胞  酵母突变体操作方法

1. 取一支无菌的 1.5ml EP 管，依次加入预冷的目的质粒 1-3μg，

Carrier DNA 5μl，100μl 冰上融化的 SUSY7/ura3 感受态细胞，

PEG/LiAc 500μl，轻轻翻转混匀 6-8 次；

2. 30℃水浴 30min，每 15min 轻轻翻转混匀 6-8 次；

3. 42℃水浴 15min，每 7.5min 轻轻翻转混匀 6-8 次；

4. 12000rpm 瞬时离心弃上清，用 100μl 0.9% NaCl 或 ddH2O 重悬，

涂板，30℃培养 48-96h。

SUSY7/ura3感受态细胞  酵母突变体注意事项

1. 使用 Carrier DNA 前，请把装有 Carrier DNA 的管子在沸水中煮

沸 5min，然后立即放在冰上，用后放在-20℃储存备用。

2. PEG 溶液在低温环境下会析出，请于常温下完全溶解后使用。

3. 转化全程要无菌操作。

4. 12000rpm 瞬时离心指离心速度升到 12000rpm 时立即停止离心。

SUSY7/ura3感受态细胞  酵母突变体操作方法

1. 取一支无菌的 1.5ml EP 管，依次加入预冷的目的质粒 1-3μg，

Carrier DNA 5μl，100μl 冰上融化的 SUSY7/ura3 感受态细胞，

PEG/LiAc 500μl，轻轻翻转混匀 6-8 次；

2. 30℃水浴 30min，每 15min 轻轻翻转混匀 6-8 次；

3. 42℃水浴 15min，每 7.5min 轻轻翻转混匀 6-8 次；

4. 12000rpm 瞬时离心弃上清，用 100μl 0.9% NaCl 或 ddH2O 重悬，

涂板，30℃培养 48-96h。