动物组织细胞总蛋白提取试剂盒
动物组织细胞总蛋白提取试剂盒
包装量:
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Components |
HYY490 |
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Total Protein Extraction Buffer(TPEB) |
100ml |
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PMSF(Protease Inhibitor,100mM) |
1ml |
产品配制和储存:为方便运输,提供PMSF为晶体状,收到后,可短暂离心后,加入1ml无水乙醇或者异丙醇溶解成100mM PMSF储液,2-8℃保存至少半年,-20℃长期保存,可分装成小份贮存于-20℃。TPEB可2-8℃保存半年,-20℃长期保存。如 TPEB有沉淀析出,可37℃-60℃水浴重新溶解完全后回复到室温使用。
产品简介:本试剂盒提供全套试剂,适用于从各种哺乳动物细胞(原代或传代细胞、贴壁或悬浮细胞等)和各种实体软组织(如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织)提取总蛋白。提取过程简单方便,无须超速离心机。本试剂盒含有的独特变性剂能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。
动物组织细胞总蛋白提取试剂盒
使用方法:
A.细胞总蛋白提取
1.每500 l裂解液,在使用前数分钟内加入5 ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM.
2.取5-10x106个细胞,在4℃,500g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3.用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.每5x106个细胞中加入500 u冷的裂解液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5.在4℃,16,000g条件下离心15分钟。
6.快速将上清转移至另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。
B.组织总蛋白提取
1.每500 l裂解液,在使用前数分钟内加入5 ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM.
2.取100mg组织样本剪碎,加入裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3.将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,16000g条件下离心5分钟。
4.快速将上清转移至另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。
上述蛋白提取物可立即用于后续实验,或分装后于-80℃冰箱保存备用。
动物组织细胞总蛋白提取试剂盒
注意事项:
1.实验过程中的所有试剂可冰上预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2.整个过程须保持样品处于低温状态。
3.蛋白浓度用BCA法测定。
动物组织细胞总蛋白提取试剂盒
