细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

Bacterial Membrane Protein Miniprep Kit

产品货号:huayueyang452         产品规格:50次

本产品仅可用于解研实验，严禁用于其他非科研用连

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒 

本试剂这是基于超迷离心的快速提取细菌模蛋白的试剂合。其原理是裂解细胞后，通过超速离心分离出细构映和附着的蛋白

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

产品特点:

1.一步式分高细胞咬和咬蛋白，密度福度离心法简单快续。

2.腰蛋白纯度高，能够去除备种胞浆蛋白的污染，也能去除松散附着在细胞膜上的蛋白，所得膜蛋白主要是整合蛋白。

3、膜蛋白完整性好，主要是由于实际中有抑制蛋白酶成分。

4.回收效李亮，一起的得到相当于总蛋白菜6%的噬蛋白。

5.可用于Ecoli，Shphimurium,K.serogersP.aeruginosa，C.crescentus等细茵

·耗材 ·培养基 ·ELISA试剂盒 >毒素细菌病毒检测

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

试剂盒组成:

储存条件:低温坛输和保存，DNae!更要低遇保存，有效期一年

地用方法:

准备:第一次使用本试剂意时需要将所有DNaseI干粉倒入溶液B中，轻柔颠倒使DNase干粉略解。未用完的部分需要放-20C保存，最好在一个月内完，否则DNase 将逐渐失去活性。此外，最好在实验苗1小时将溶液B冰浴预冷。

用法一:电量制备(丰要用干上程量出特小的SDS-PAGE电建装索验)

1.收集20-40mL 过夜培养的维菌购和培养被0D420在1.5左右即可1，2500g率温惠小10分钟后弃上清

2.加入2rmL溶液A，轻柔吹打，将细茵重悬于溶液A中。3，2500q室温离心10分钟后弃上清。

4.加入0.5mL油液B|必须已经提前加入了DNase干粉)，轻柔吹打使细菌重量。注:如果地菌起始量没有20-40mL，溶液A的用量可以等比例降低。重县在溶装A中的细菌可以放-80℃长期保存。

5、用超声或French Press方法警解维胞。如果用French Press方法，则需要处理至少两次，每次的压力为9.65x10E7(=14000 psi)。注意:不论用哪种裂解方法，都必须在显微镜下检查地菌是否已经裂解。否则还需要重复细菌餐解过程，直到80%以上的细茴都裂解为止，

6.2600g室温满心8分钟后小心转移上清到新的10mL-15mL塑料离心营中|如Beckman Optima台式超述离心机离心管)，弃沉定(未破裂细画)。

7。在上清(细苗制船液|中加入5mL预冷的溶液C，轻柔颜例温匀后冰落放置30-60分钟。其间可以轻染颜倒混匀3-5次。

8.用 Bechman Cptima 台式超速需心机115000g4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致，否则有可能得不到沉淀。

9、小心称忘上请，在沉淀中加入0.2mL溶法A，充分吹打混句。

10.用Beckman Optima 台式超速离心机 115000g4C离心60分钟。也可以使用其他冷东超速离心机，但康心力应该一致，否则右可的得不到沉定。

11、小心将弃上清，所得深注放-20*℃长期保存，也可以真接加入0.1mL白备的，跟后继实验兼容的缓冲液(加1xSDS-PAGE上样液中，可从本公司购买!，所得睡蛋白的浓度将在1ma'mL左右。

用法二:大量制备(主要用于上样量比较大的2D电泳等实验)

1，收集200-400mL过夜培养的细苗馆和培养液(QD420在1.5左右即可)，2500g室四商心10分钟后弃上清

2.加入20mL溶油A，轻柔吹打，寄细菌重悬于溶液A中。3，25000室温离心10分钟后弃上清。

4.加入5mL溶液刚必须已经提的加入了DNase l千粉)，轻柔吹打使细菌重悬。注:如果细菌起始量没有200-400mL，消波A的用量可以等比例降低。重悬在溶波A中的细菌可以放-80℃长期保存。

5、用超声或French Press方法装解细胞。如果用French Prees方法，则需要处理至少两次，每次的压力为9.65x10E7(=14000 cs)、注意:不论用吃种裂解方法，都必须在罪待钟下检查旧菌是否已经裂解，否则还需要重复细菌务解过程，真到80%以上的细茵都製解为止。

6.2500g室温离心8分钟后小心转移上清到干净的玻璃烧杯中，弃记定(未破星细胞).

7.在上请(细菌裂解液|中加入50mL预冷的溶液C，轻轻在冰浴中提拌混匀30-60分钟。注:可以在大烧杯中装冰，然后将装有样品的小烧杯放入，在成入干净的提拌子，以最低速度提拌。

8.用 Beckman Type 55.2 Ti转头 115000g 4C离心60分钟，也可以使用其他冷冻超速离心机，但需心力应该一致9，小的称在上请，在沉定中加入2mL简液品，充分应打得匀，

10，用Beckman Tvpe 55.2 T精头 115000g4C商心60分钟。也可以使用其他冷东超速商心机，但应心力应该一致。

11.小心将弃上清，所得深注放-20*C长期保存或溶解车imL自备的，眼后接客哈兼容的国冲港(t1x等电点申法上样液。可从本公司购买)，所得膜蛋白的浓度在imgimL左右。

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