LacZ基因胞外表达显色试剂盒
LacZ基因胞外表达显色试剂盒(EGY48 酵母菌)
LacZ extracellular Expression color rendering Kit
CAT:huayueyang000821
CAS:N/A 级别:N/A 纯度:N/A
分子式:N/A 分子量:N/A
LacZ基因胞外表达显色试剂盒
储存条件:常温保存，X-Gal储存液-20℃保存，有效期一年。
产品内容:
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成分 |
规格 |
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10xBU buffer(过滤除菌) |
100mL |
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K-Gal储存液(20ng/ml) |
5mL |
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20%半乳糖溶液(过滤除菌) |
100mL |
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20%棉子糖溶液(过滤除菌) |
50nL |
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SD/-Trp/-Ura with Agar(干粉) |
0.5L |
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SC/-Trp/-Ura Broth(干粉) |
8g |
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Agax |
20g |
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说明书 |
1份 |
LacZ基因胞外表达显色试剂盒
产品介绍:
本试剂盒用于EGY48酵母杂交系统中，LacZ报告基因的检测;当有互作发生，LacZ报告基因表达，生成β-半乳糖苷酶，将X-Gal切割成半乳糖和深蓝鱼的底物5-溴-4氯靛蓝。
筛选培养基配制:(SD/-Trp/-Ura平板)
1.请将0.5 L的SD/-Trp/-Ura with Agar干粉，加入500mL的蒸馏水中，搅拌溶解。
2.115 ℃灭菌20 min，冷却后倒板;
注意:灭菌的培养基如有剩余，可置于超净台密封保存，再次使用时微波加热溶解后倒板即可。
显色培养基配制:(SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-Gal平板)
- 组分配比，见下表:
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组分 培养基体积 |
100mL |
500mL |
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20%半乳糖溶液 |
10ml |
500mL |
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20%棉子糖溶液 |
5ml |
50ml |
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10xBU buffer |
5ml |
25ml |
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X-ga1储存液(20ng/m1) |
10ml |
50nL |
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Aegr |
0.4mL |
2mL |
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SC/-Trp/-Ura Broth |
0.Bg |
4g |
2.根据需要按照上表称取适量SC/-Trp/-Ura Broth和Ag?水至75ml搅拌溶解。
3.115 ℃灭菌20 min;同时预热20%半乳糖溶液、20%棉子糖。
4.培养基冷却到55℃左右后加入预热的上述成分以及X-gal储
存液，混匀倒板。
注意:显色平板请尽快使用。3天内避光4℃保存的板子亦可
以使用。
LacZ基因胞外表达显色试剂盒
实验方法:(以EGY48-pLacZi酵母单杂交体系为例)
1.载体构建pLacZi-X&pB42AD-Y;
2.载体共转化EGY48酵母感受态细胞(参照SK2400使用说
明)。
3.转化产物涂布SD/-Trp/-Ura with Agar 平板，28-30℃培养
3-5天。
4.随机选择5个单菌落，Marker笔做好标记，挑取少量菌落做
阳性克隆检测(参照SK2420使用说明)。
5.挑取鉴定为阳性克降的菌落涂布SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-
Gal with Agar显色平板，28-30 ℃培养3-5天后观察显色户
应。
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