DH10MultiBac感受态细胞
DH10MultiBac感受态细胞
货号：huayueyang459
感受态细胞基本信息:
感受态细胞名称: DH10MultiBac, DH10 MultiBac
菌株类型: E.coli
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃，有氧
抗性: 氨苄和卡那
质粒转化条件:42℃,热激
应用: 昆虫细胞多种异源蛋白表达
DH10MultiBac感受态细胞
菌株特点:
DH10MultiBac是昆虫细胞同时表达多种异源蛋白时使用的杆粒制备菌株。
感受态细胞特点和简介:
DH10B 感受态细胞是高效、化学感受态大肠杆菌细胞。该 DH10B 株适于克隆含甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶和甲基腺嘌呤的 DNA，可高效克隆原核和真核基因组 DNA。这些细胞适用于构建基因库或使用质粒衍生载体生成 cDNA 文库。φ80dlacZΔM15 标志物提供了来自 pUC 或类似载体的 β-半乳糖苷酶基因的 α-互补，可用于在含有 Bluo-Gal 或 X-Gal 的细菌琼脂平板上进行蓝白斑菌落筛选。
DH10MultiBac感受态细胞
•高转化效率：>1x109 cfu/µg pUC19 DNA
• 适用于常规和高通量克隆应用
• 可进行蓝白斑菌落筛选
•使用便利，每瓶包装可进行两次反应
• 包含 S.O.C.外生长培养基
应用:
DH10B 感受态细胞适用于需要高转化效率的多种应用：
•原核和真核来源的高效 DNA 克隆
• 大质粒和 BAC 克隆
• 适用于使用质粒衍生载体生成 cDNA 文库
• 定点诱变
DH10MultiBac感受态细胞
基因型:
F–mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139Δ (ara-leu)7697 galU galKλ–rpsL(StrR) nupG
感受态细胞操作方法:
- 取出感受态细胞，置于冰上5分钟，解冻。
2．向感受态细胞中加入1-10μl连接产物，轻弹离心管底部混匀，冰上放置30 min。
3．置于42℃热激60s后，迅速置于冰上急冷2分钟。
4．向热激完毕的感受态细胞中，加入700μl经37℃预热的LB(或SOC)培养基(不含抗生素)，37℃振荡（225 rpm）培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5．室温4,000 rpm离心5分钟，弃去700μl上清后，用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
6．将平板置于37℃培养，12~14小时后可出现菌落。
DH10MultiBac感受态细胞
感受态细胞注意事项:
1．感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。
2．所有操作均需注意无菌操作。
3．pUC18 plasmid 标准品（0.2 ng/μl），含有氨苄青霉素抗性，作为阳性对照使用，每次转化5μl，可以得到约100～1000个克隆。
DH10MultiBac感受态细胞，DH10MultiBac感受态细胞
