高尔基体提取试剂盒
高尔基体提取试剂盒
Golgi body extraction kit
产品货号:huayueyang449 产品规格:50|100T
本产品仅可用于科研实验,严禁用于其他非科研用途
高尔基体提取试剂盒可用于各种动物细胞和实体软,硬坦织样本的高尔基体提取,提取得到的高尔基体具有光整生物活性,可以用于 ,凝胶迁哆EMSA 高尔基体功能研究,蛋白提取等各种下落应用。本试剂意可以用于冻存排本的握取。
本产品提取得到的高尔基体具有表整生物活性,可用于高尔基体功能研究、蛋白提取等各种下游应用。
高尔基体提取试剂盒背景资料:
血液制品 高尔基体是由许名毒平的表询相查的以分泌为丰幕功作的相响圈。不陈惠尔基同或高尔基复合体:高尔基体是由数个表要 *培养基 囊润堆在一起形成的高度有股性的堆作器,常分布干内后网与的的神之间,呈弓形或半球形,凸出的一面对着内后网称为形成 ELISA试剂童 面或顺面。回进的一面对着质晚称为成熟面或反面,顺真和反面都有一些或大或小的运输小泡,在具有极性的细电中,高尔基 ,毒素细菌病毒检测 体常大量分布干分油营的细胞压中。因其看上极像滑面内后网,因此有科学家认为它是由滑面内后网进化而来的。
高氙基体中的酶主要有极基转移酶,磺基-精基装移酶,氧化还原酶、销酸酶、蛋白激酶、甘路糖苷障、转移酶和磷房障等不同的类型、真尔基体的主要功能格内压网合成的蛋白后进行加工。对比分类,与怀装。然后分门制类的送到旧取特定的部位或分泌到细室外。
高尔基体提取试剂盒产品组成:
组成 |
50T |
100T |
:烟苗慢蛋白抽提液A |
25mL |
50mL |
拍苗隆蛋白挂提液日 |
250UL |
500uL |
腆蛋白溶解波C |
10mL |
20mL |
蛋白酶抑制剂温合物 |
100mL |
2x100ml |
保存:2~8℃,有效期1年。
日备器材:
移液器,离心机、消旋混匀器,振落器,Dounce匀求器、PBS缓冲液
注意事项:
1.旋帽离心营装的试剂在开盖前请短智离心,将着内壁上的油体甩至管底,继免开盖时波体洒落,
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温;
3.最好使用Dounce匀装器匀装,如果没有标准Dounce勾装器,用普通1mL玻璃匀浆器匀装也可。但是高尔基体回收率会下降,
高尔基体提取试剂盒使用方法:
A.细胞高尔基体提取:
1.取1-2-107个证电,在4*C,500mg条件下商心2~3分钟,小心吸取培养基,话可能吸干,收售细购注:
.贴壁培养细胞用胰酶消化下来或者用刮刀刮助均可。
2.用冷PBS迭涤两次,每次洗涤后尽可能或于上清。注:
·用1000xg力离心5分钟。
3、加入50QL冷的试剂A重量细胞,置冰上10分钟。
4.用Dounce匀装器充分匀余几分钟。
【注】
.先用Dounce匀装器的松型槌初步匀装20-30次,再用紧型槌匀素20-30次。。每上下一个来回为一次。
5.将匀美液在4℃,1000xg力条件下商心5分钟。
6、将上清吸入另一预冷的干净离心管,弃沉淀。
7.将上请在4℃,3000xg力条件下需心10分钟。
8.将上清没入另一预冷的干净离心管,弃沉淀。
9.将上请在4℃,5000xg力条件下离心10分钟。10,将上清吸入另一预冷的干净声心管,弃沉定。11,在上清中加入10UL试剂WT。
12.在4℃,20000xg力条件下离心20分钟,弃上清,留沉淀。13.在沉定中加入500uL冷的试剂日,经轻滑句。14,在4c,20000mg力条件下商心30分钟。15.弃上清,沉淀用高尔基体保存液重悬。
注:
。 也可不用试剂富中的高尔基体保存液重悬。
。根据实脸需要选择合适的地冲液重是高尔基体或直线用于下游实验。16.即得到真尔基体样品。置冰箱备用或直接用于下的实验。 B.坦坦嘉尔基体提服:
1.取50~100ma新能动物相织样本,用PBS选涤干净。2,用手术葛刀尽可的尊砖。用冷PBS洗清两次。注:
·用1000xg力商心5分钟。
3、加入50QL冷的试剂A重量细胞,置冰上10分钟。
4.用Dounce匀浆器充分匀杀几分钟。注:
· 先用Dounce匀浆屋的松型槌初步匀浆20~30次,再用紧型植匀象20-30次。。每上下一个来回为一次。
5.将匀票被在4℃。1000xg力条件下需心5分钟。6。将上请没入另一预冷的干态真心管,再沉定。
7.将上请在4℃,3000xg力条件下离心10分钟。
8.将上清没入另一预冷的干净离心管,弃沉淀。
9.将上请在4℃,5000xg力条件下需心10分钟,10.将上清没入另一预冷的干净离心管,弃沉淀。11,在上请中加入1CUL试剂WT.
12.在4℃,20000xg力条件下离心20分钟,卉上清,留沉淀。13.在沉淀中加入500pL冷的试剂日,轻轻调句。14.在4℃,20000xg力条件下离心30分钟。15.弃上请,沉范用高尔基体保存液重量。
注:
。也可不用试剂富中的高尔基体保存液重悬。
。根据实脸需要选择合适的提冲液重最高尔基体或直接用于下游实验。16.即得到夷尔基体样品,置冰箱备用或直统用于下游实验。
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