酵母活性检测试剂盒

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酵母活性检测试剂盒

是应用新型的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测酵母活性的比色检测产品。
AlamarBlue 是一种氧化还原指示剂，能根据酵母的代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性，因此对应的信号较低。
AlamarBlue 在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，其吸收峰为530-560nm，而散射峰为590nm。在酵母细胞增殖过程中，细胞内处于还原环境。进入酵母细胞内的活性检测染料被代谢中间体及细胞色素类还原后释放到酵母细胞外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测，吸光度和荧光强度与活性酵母细胞数成正比。染料经过验证安全无毒，可以用于酵母细胞活性和酵母细胞增殖的定量分析细胞毒性研究。
AlamarBlue 的无毒特性使酵母细胞可长期暴露于这种染料，因此可随时间进行测量或进行终点测量。
AlamarBlue 法采用单一试剂，可以连续、快速地检测酵母细胞的增生状态。由于AlamarBlue对酵母细胞无毒、无害，不影响细胞的蛋白质合成与分泌等活性，因此可以对同一批酵母细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察，因此有操作简便和几乎不干扰酵母细胞正常代谢的特点。

酵母活性检测试剂盒

储存条件：检测液2-8℃避光保存；
【注】
●长期不用可以-20℃保存。需要长期保存可以分装后-20℃保存，避免反复冻融。
● 冻存后融解时注意重新混匀。
有效期：一年。
酵母活性检测试剂盒
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
酵母活性检测试剂盒
注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
● 使用方便：仅使用单一试剂；
● 灵敏度高，数据可靠，重现性好，线性范围更宽；
● 结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；
● 无需放射性同位素和有机溶剂，对微生物毒性低；
● 适合于高通量药物筛选。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
●酶标仪/分光光度计 ●培养箱 ● 离心机 ● 移液器 ● 冰箱 ● 冰盒
试剂：
● PBS缓冲液(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1×)) ●或者HBSS
耗材：
● 离心管 ● 吸头 ● 96孔培养板
酵母活性检测试剂盒

使用方法：

使用注意事项：
● 正式实验前，建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入Alamar Blue试剂后的培养时间。
● 整个过程均应为无菌操作，因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
● 注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长，会导致继发性还原反应，产生无色和荧光消失。
● 孵育时，须避光。
●本产品可以使用荧光或分光光度检测，但荧光的灵敏度高，实验误差小，推荐使用荧光检测。
1．收集待检测的酵母细胞。
2．用PBS或生理盐水洗涤酵母细胞2次。
3．将酵母细胞用PBS重悬，调整细胞悬液浓度为1×107/ml。
4．96孔板中每孔加入200μl细胞悬液。将AlamarBlue 活性检测试剂于洁净工作台内按10μl/孔加入微孔板中，在细胞培养箱内继续孵育2－12小时，液体颜色部分出现由蓝变为粉红为止(如采用荧光分光光度法，只需孵育0.5－6小时)；
【注】
● 根据不同酵母种类和不同的活性状况差异，需要的孵育时间差异较大，具体以预实验的结果为准。
5．在570nm测定吸光度，参考波长600nm。如无此滤光片，可用565nm和610nm的滤光片替代。
6．也可用荧光分光光度法检测荧光强度，激发光波长在530-560nm之间，发射光波长为590nm。

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