Lemo21(DE3)感受态细胞

       Lemo21(DE3) Chemically Competent Cell

 编码

 产品名称

保存条件

规格

WG 1221-3

Lemo21(DE3)感受态细胞

 

-80六个月

10*100ul

WG 1221-4

Lemo21(DE3)感受态细胞

 

-80六个月

20*100ul

Lemo21(DE3)感受态细胞感受态细胞

产品规格:

Lemo21(DE3)感受态细胞:                           10×100μl

pUC19control vector):10pg/μl       10μl

 

Lemo21(DE3)感受态细胞基因型:

fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] hsdS/ pLemo(CamR)DE3 = λ sBamHIo EcoRI-Bint::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 nin5 pLemo = pACYC184-PrhaBAD-lysY

Lemo21(DE3)感受态细胞产品说明:

TG1来源于E. coli K-12菌株,是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株,在平板上37℃7h可见克隆。主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于普通质粒的构建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。本公司生产的Lemo21(DE3)感受态细胞是采用特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率高达107cfu/μg DNA以上。

Lemo21(DE3)感受态细胞操作方法:

1.Lemo21(DE3)感受态细胞感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。  

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

Lemo21(DE3)感受态细胞注意事项:

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。


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