酵母蛋白提取试剂盒
酵母蛋白提取试剂盒
产品及特点：
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于 SDS-PAGE 凝胶电泳和
Western 印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法，适合于
各种形态的各种酵母材料。本产品的其主要特点是：
1. 破壁效率高，能达到 80-90%。
2. 可以处理各种酵母样品。
3. 操作简单，得到的裂解液可以直接用于 SDS-PAGE 和 Western 印迹分析。
产品组成：
成 份 | 编 号 | 50 次包装 |
溶液 A | HYY23964 | 100 mL |
溶液 B 成分一 | 50 mL | |
溶液 B 成分二 | 1.5 g | |
玻璃珠，400μm | 5 g | |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存：常温运输、4℃保存（溶液 B 成分二需-20℃保存），有效期一年。
自备试剂：酵母培养基
使用方法：准备工作：将溶液 B 成分二（干粉）全部加到 50mL 溶液 B 成分一中，充分摇晃使之全部溶解，成为溶液 B，然后分装成小分（体积根据每次实验的样品数决定）并放-20℃长期保存。
1、 将酵母细胞接种到 5mL YPD 培养基中，30℃摇晃（250rpm/分钟）过夜培养使其 OD600 达到 0.5～2.0。
2、 把酵母细胞培养物转到装有 2mL 预冷溶液 A 的 10-15 mL 离心管中，混匀。
3、 4℃ 5000g 离心 5 分钟沉淀酵母细胞，吸出上清液。
4、 用 30μL 溶液 B 悬浮酵母细胞，并快速转移到 1.5mL 塑料离心管中。
5、 100℃下保温 3 分钟，使蛋白酶失活，样品存放于-20℃。
6、 加入 0.1g 的玻璃珠。
7、 在旋涡振荡器上剧烈振荡混合 2-10 分钟。
8、 加入 70 μl 溶液 B，稍加振荡，置 100℃保温 1 分钟。
9、 取 5-20μl 抽提液上样直接进行 SDS-PAGE 凝胶电泳。
注：若蛋白浓度较高，细胞破裂后可用多余溶液B适当稀释后再电泳。
