全能核酸酶

Benzonase Nuclease


产品货号

产品名称

北京华越洋生物GT597

全能核酸酶

全能核酸酶产品说明:

全能核酸酶,又称广谱核酸酶,英文名称Benzonase Nuclease,一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6M urea0.1 M Guanidine HCl0.4% Triton X1000.1% SDS1 mM EDTA1 mM PMSF)降解所有形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNARNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。

本产品由经基因工程改造的真核生物酵母菌表达纯化所得,不含原核生物表达体系自身的细菌内毒素,不仅应用在科研研究中,作为培养细胞上清和细胞裂解液去粘度的首选酶制剂,去除核酸干扰提高后续蛋白纯化或功能研究;而且应用在疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业,去除宿主残留核酸,大大降低疫苗和蛋白类产品核酸污染至皮克级别,提高制品生物功效。

本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20mM Tris-Cl pH8.02mM MgCl22mM NaCl50%甘油)中,无色透明液体。

 

全能核酸酶产品性质:

英文别名(English Synonym

BenzNuclease; Universal Nuclease; Benzonase   endonuclease

CAS号(CAS NO.

9025-65-4

分子量(Molecular Weight

27.9 kDa

纯度(Purity

≥90%SDS-PAGE

酶活(Enzyme Activity

≥250 U/μL

比活(Specific Activity

≥1.0×10U/mg蛋白

蛋白酶(Protease

Undetected

内毒素(Endotoxin

Undetected(鲎试剂法)

最适pHOptimum pH

8.0(工作范围pH 6-10

最适温度(Optimum Temperature

37(工作范围0-42

辅助因子(Cofactor

1-10 mM Mg2+

储存缓冲液(Storage Buffer

20 mM Tris-Cl pH8.02 mM MgCl22 mM   NaCl50%甘油

稀释缓冲液(Dilution Buffer

20 mM Tris-Cl pH8.02 mM MgCl22 mM   NaCl

活性单位定义(Unit Definition

37pH 8.0反应条件,2.625 mL反应体系中,在30 min内使A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。

 

全能核酸酶使用方法

1 细胞处理:a.贴壁细胞去除培养基,用PBS洗后,1 mL RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加10-20 uL全能核酸酶,室温或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。

b.悬浮细胞离心收集后,在离心管中加1 mL RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加10-20 uL全能核酸酶,室温或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。

2 组织样品:将30-100 mg动物或者植物组织研磨充分后,加入100-200 uL裂解液,同时加入加5-10 uL全能核酸酶,室温或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。

3 大肠杆菌或者其他细菌:细菌离心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每1 mL1-5 uL全能核酸酶,室温孵育30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。

注:若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶量或孵育时间。


 

 

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